Fruto de uma relação entre a sua mãe e um turista inglês — que só conheceria já adulto, aos 34 anos[3] — o ator cresceu no Algarve, tendo sido criado pela sua mãe e pela sua avó, que exploravam um empreendimento turístico em Quarteira.
Por volta dos 18 anos iniciou a sua vida profissional como guia intérprete, depois de completar um curso técnico-profissional nessa área. Ao mesmo tempo dedicou-se ao teatro amador, tendo a sua primeira experiência de representação em Faro, no Teatro Lethes, com a peça Os cães, de Tone Brulin.[4] Em 1988 resolveu candidatar-se à Escola Superior de Teatro e Cinema, onde viria a terminar o curso de Teatro, variante de Formação de Atores, aos 24 anos, em 1991.
Estudava ainda quando, no ano de 1989, se estreou como ator profissional na peça As Sabichonas, de Moliére, dirigido por Ruy de Matos, no Teatro Nacional D. Maria II. No mesmo ano conseguia o seu primeiro papel no cinema: Nuvem, de Ana Luísa Guimarães (que virá a estrear somente em 1992), rendendo ao jovem ator o Prémio de Melhor Jovem Ator e o Se7e de Ouro.
Quase ao mesmo tempo que se profissionaliza como ator, desenvolve a sua carreira como encenador. Entre as peças que dirigiu constam, para o Teatro da Trindade, O Amante de Harold Pinter (1992), e Segredos de Richard Cameron (1993); para o Teatro Villaret, Odeio Hamlet de Paul Rudnick (1996); para o São Luiz, Um Vestido para Cinco Mulheres de Alan Ball (1997); para o D. Maria II, O Jardim Zoológico de Cristal de Tennessee Williams (1999); para o Maria MatosLaramie de Kaufman (2006).
Desde a década de 1990 que vem sendo também um solicitado ator de televisão, com participação em diversas séries e novelas. Estreou-se em Por Mares Nunca Dantes Navegados (1991), após o que foi chamado para integrar o elenco de A Banqueira do Povo (1993), onde contracenava com nomes tão consagrados como Eunice Muñoz, Curado Ribeiro, Carmen Dolores ou João Perry. Seguir-se-ão produções como Aquela Cativa que Me Tem Cativo (1995), Riscos (1997), Os Lobos (1998) ou Jornalistas (1999). A telenovela Jóia de África (2002) deu-lhe um terceiro Globo de Ouro, desta vez na qualidade de Melhor Ator de Ficção Televisiva. As últimas séries que fez foram Regresso a Sizalinda, A Ferreirinha, Voo Directo e Depois do Adeus, todas na RTP1.
Vencedor dos Globos de Ouro como Melhor Ator de Cinema, em 1996 e 1998, salienta a nível internacional o Prémio das Nações Unidas em 1995; o Festival de Gramado atribuí-lhe o Prémio de Melhor Ator pelo seu desempenho em A Sombra dos Abutres, em 1999, ano da sua promoção como Shooting Star pela European Film Promotion.
Esporadicamente foi apresentador de programas, também RTP1, com Pátio da Fama (1995), As Canções da Nossa Vida (1999), Quem Quer Ser Milionário (2001) e Cuidado com a Língua (2006).
Também participou em várias dobragens animadas, sobretudo em filmes da Disney. Entre elas o Príncipe Eric no filme A Pequena Sereia, e o pai da Riley em Inside Out- Divertidamente.
Desempenhou o cargo de diretor artístico do Teatro Maria Matos, desde 2006 até 2008, de onde se demitiu por falta de verbas para a conclusão dos seus projetos. A seguir foi nomeado diretor artístico do Teatro Nacional D. Maria II, tendo sido demitido do cargo em novembro de 2011.[6] Em 2017, foi nomeado diretor artístico do Teatro da Trindade, após a saída de Inês de Medeiros para assumir a presidência da Câmara de Almada.[7]
É praticante de hipismo, participando em competições de saltos.[8]
Filho natural de pai Inglês, de seu nome Jonathan, e de mãe Portuguesa, Maria Infante de Lacerda, falecida em 2010, também ela filha natural de Renée Lance Infante de Lacerda (19 de Fevereiro de 1918 - ?), filha do 5.º Barão de Sabroso e cuja mãe era Francesa.
Numa entrevista ao jornal Expresso em abril de 2012, revelou que tinha adotado, há cerca de um ano, uma criança de nome Filipe de 9 anos de idade.[9] Em 17 de outubro de 2013 casou pelo registo civil em Torres Vedras com Rui Calapez, agente do ator e companheiro de vários anos.[10]
↑«Diogo Infante é pai». Revista Fama. fama.sapo.pt/. 21 de abril de 2012. Consultado em 20 de outubro de 2013. Arquivado do original em 25 de abril de 2012