Samsunspor 2000-01 sezonu, kırmızı beyazlı ekibin 1. Futbol Ligi'ndeki yirmi dördüncü sezonu, kuruluşunun ise otuz altıncı yılıdır. 1. Futbol Ligi ve Türkiye Kupası'nda mücadele eden kulüp kupada 3. turda elenmiş, ligi ise 8. olarak tamamlamıştır. Takım, sezona Bülent Ünder yönetiminde başlamış, 30. haftadan itibaren Yücel Uyar görevi devralmıştır. Sezonun en çok gol atan oyuncusu 12 golle İlhan Mansız olmuştur.
Kadro
Not: Uyruk bilgisi futbolcuların FIFA uygunluk kurallarınca oynayabileceği millî takımı gösterir. FIFA kuralları haricinde başkaca uyruğa da sahip olabilirler.