La Coppa Italia Serie D 2009-2010 è stata l'undicesima edizione della manifestazione. Vi hanno partecipato tutte le 166 squadre iscritte al campionato di Serie D 2009-2010 che si sono affrontate in partite ad eliminazione diretta. È iniziata il 22 agosto 2009 ed è terminata il 28 aprile 2010 con la vittoria del Matera.
Regolamento
I primi cinque turni, turno preliminare, primo turno, trentaduesimi, sedicesimi e ottavi di finale, saranno disputati con gare di sola andata. Quarti, semifinali e finale con gare di andata e ritorno.
Nel caso di parità al termine degli incontri, sia di sola andata che andata/ritorno, non verranno disputati i tempi supplementari ma si tireranno direttamente i calci di rigore.
Il primo turno prevede la disputa di 57 gare di sola andata riservato alle seguenti squadre:
45 vincenti il turno preliminare;
69 ammesse di diritto, tranne le 5 società partecipanti alla TIM CUP 2009/2010 in organico alla Serie D, la vincente e la semifinalista della Coppa Italia Serie D 2008/2009.