Il Trofeo Matteotti 2000, cinquantacinquesima edizione della corsa, si svolse il 30 luglio 2000 su un percorso di 189 km, con partenza e arrivo a Pescara, in Italia. La vittoria fu appannaggio del bielorusso Jaŭhen Senjuškin, che completò il percorso in 4h46'55" alla media di 39,524 km/h, precedendo gli italiani Massimo Donati e Luca Mazzanti.
Ordine d'arrivo (Top 10)
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