Célula tumoral circulante

Una ilustración que muestra el tumor primario (en forma de microambiente tumoral) y las células tumorales circulantes

.

Una célula tumoral circulante (CTC) es una célula cancerosa de un tumor primario que se ha introducido en el torrente de sangre del sistema circulatorio, o en la linfa del sistema linfático.[1]​ Las CTC se transportan por el cuerpo a otros órganos donde pueden salir de la circulación y convertirse en la semillas para el posterior crecimiento de tumores secundarios.[2]​[1]​ Esto se conoce como metástasis, y es responsable de la mayoría de las muertes relacionadas con el cáncer.[3]​

La detección y el análisis de las CTC pueden ayudar al pronóstico precoz de los pacientes y a determinar tratamientos adaptados adecuados.[4]​ Actualmente, existe un método aprobado por la FDA para la detección de CTC, CellSearch, que se utiliza para diagnosticar cánceres de mama, colorrectal y de próstata.[5]​

La detección de CTC, o biopsia líquida, presenta varias ventajas sobre las biopsias tradicionales de tejido. No son invasivas, pueden utilizarse repetidamente y proporcionan información más útil sobre el riesgo metastásico, la progresión de la enfermedad y la eficacia del tratamiento.[6]​[7]​ Por ejemplo, el análisis de muestras de sangre de pacientes con cáncer ha encontrado una propensión a una mayor detección de CTC a medida que la enfermedad progresa.progresses.[8]​ Los análisis de sangre son fáciles y seguros de realizar y pueden tomarse múltiples muestras a lo largo del tiempo. En cambio, el análisis de tumores sólidos requiere procedimientos invasivos que podrían limitar el cumplimiento terapéutico del paciente. La capacidad de controlar la progresión de la enfermedad a lo largo del tiempo podría facilitar la modificación adecuada de la terapia de un paciente, mejorando potencialmente su pronóstico y calidad de vida. El aspecto importante de la capacidad de pronosticar la progresión futura de la enfermedad es la eliminación (al menos temporalmente) de la necesidad de una intervención quirúrgica cuando los recuentos repetidos de CTC son bajos y no aumentan; entre los beneficios obvios de evitar la intervención quirúrgica se incluye la evitación del riesgo relacionado con la tumorogenicidad innata de las cirugías oncológicas. Con este fin, recientemente se han desarrollado tecnologías con la sensibilidad y reproducibilidad necesarias para detectar CTC en pacientes con enfermedad metastásica.[9]​[10]​[11]​[12]​[13]​[14]​[15]​[16]​ Por otro lado, las CTC son muy raras, a menudo se presentan solo en número de unas pocas células por mililitro de sangre, lo que hace que su detección sea un reto. Además, a menudo expresan una variedad de marcadores que varían de un paciente a otro, lo que dificulta el desarrollo de técnicas con alta sensibilidad y especificidad.

Tipos

Las CTC que se originan en carcinomas (cánceres de origen epitelial, que son los más prevalentes) pueden clasificarse en función de la expresión de sus marcadores epiteliales, así como de su tamaño y de si son o no apoptóticas. En general, las CTC son anoikis-resistentes, lo que significa que pueden sobrevivir en el torrente sanguíneo sin adherirse a un sustrato.[17]​

  1. Las CTC tradicionales se caracterizan por un núcleo intacto y viable; por la expresión de EpCAM (Epithelial cell adhesion molecule) y citoqueratinas, que demuestran un origen epitelial; por la ausencia de CD45, que indica que la célula no es de origen hematopoyético; y por su mayor tamaño, forma irregular o morfología subcelular. [18]​
  2. Las CTC citoqueratina-negativas se caracterizan por la ausencia de EpCAM o citoqueratinas, lo que puede indicar un fenotipo indiferenciado (células madre cancerosas circulantes) o la adquisición de un fenotipo mesenquimal (conocido como transición epitelio-mesénquima, o EMT, por sus siglas en inglés). Estas poblaciones de CTC pueden ser las más resistentes y propensas a la metástasis. También son más difíciles de aislar porque no expresan ni citoqueratinas ni CD45. Por lo demás, su morfología, expresión génica y genómica son similares a las de otras células cancerosas.[19]​
  3. Las CTC apoptóticas son CTC tradicionales que están sufriendo apoptosis (muerte celular programada). Éstas pueden utilizarse para monitorizar la respuesta al tratamiento, como se hace experimentalmente con el método de Epic Sciences, que identifica la fragmentación nuclear o las manchas citoplasmáticas asociadas a la apoptosis. La medición de la proporción entre CTC tradicionales y CTC apoptóticas -desde el inicio hasta el tratamiento- proporciona pistas sobre la eficacia del tratamiento para destruir las células cancerosas.[19]​
  4. Las CTC pequeñas son positivas para citoqueratina y negativas para CD45, pero con tamaños y formas similares a los glóbulos blancos. Es importante destacar que las CTC pequeñas tienen biomarcadores específicos del cáncer que las identifican como CTC. Las CTC pequeñas han sido implicadas en la enfermedad progresiva y la diferenciación en carcinomas de células pequeñas, que a menudo requieren un curso terapéutico diferente. [20]​

Agrupaciones o clústers de CTC

Células tumorales circulantes y agrupaciones de CTC

Las células tumorales circulantes suelen estar presentes en grupos.[21]​ Los clústers de CTC son agregados de dos o más células tumorales circulantes (CTC), unidas entre sí. Estos conglomerados pueden estar formados por CTC tradicionales, pequeñas o citoqueratina negativas y portan biomarcadores específicos del cáncer, lo que las distingue de otras células en circulación. Los estudios han demostrado que las agrupaciones de CTC se asocian a un mayor potencial metastásico y a un mal pronóstico. Por ejemplo, la investigación ha demostrado que los pacientes con cáncer de próstata que sólo tienen CTC aisladas presentan una tasa media de supervivencia ocho veces mayor en comparación con los que tienen agrupaciones de CTC. También se han observado resultados similares en el cáncer colorrectal.[22]​[23]​

Existen dos tipos de conglomerados de células tumorales circulantes: el que está formado únicamente por células cancerosas se denomina homotípico. Un grupo de CTC que también incorpora otras células, incluidos glóbulos blancos, fibroblastos, células endoteliales y plaquetas, se denomina heterotípico.[24]​ Los grupos heterotípicos también se conocen como microémbolos. Se sugiere que estos microémbolos podrían aumentar el potencial metastásico.[21]​

La hipótesis del éxodo del cáncer sugiere que los grupos de CTC permanecen intactos durante el proceso metastásico, en lugar de disociarse en células individuales, como se suponía anteriormente. Según esta hipótesis, los conglomerados entran en el torrente sanguíneo, viajan como una unidad cohesionada y salen de la circulación en puntos metastásicos distantes sin disgregarse. Esto permite a los conglomerados conservar su multicelularidad, lo que aumenta su eficacia metastásica. La hipótesis postula que la ventaja de supervivencia proporcionada por el soporte intercelular dentro de los grupos aumenta su potencial metastásico en comparación con las CTC individuales.[22]​[24]​

Los clústers de CTC presentan perfiles de expresión génica distintos, lo que les confiere resistencia a determinadas terapias contra el cáncer, haciéndolos más resistentes que las células tumorales individuales. Su capacidad para permanecer multicelulares durante la metástasis puede explicar su mayor supervivencia y potencial metastásico. [25]​

La investigación sobre los grupos de CTC y su papel en la metástasis sigue evolucionando, y la hipótesis del éxodo del cáncer ofrece una nueva perspectiva sobre cómo estos grupos contribuyen a la progresión del cáncer. La detección y el análisis de los grupos de CTC proporcionan información pronóstica crítica y podrían ayudar a guiar las decisiones terapéuticas para los pacientes con cáncer.[26]​

Frecuencia

La detección de CTC puede tener importantes implicaciones pronósticas y terapéuticas, pero debido a que su número puede ser muy pequeño, estas células no se detectan fácilmente.[27]​ Se estima que entre las células que se han desprendido del tumor primario, sólo el 0,01% puede formar metástasis.[28]​ Las células tumorales circulantes se encuentran en frecuencias del orden de 1-10 CTC por mL de sangre total en pacientes con enfermedad metastásica. [29]​ En comparación, un ml de sangre contiene unos pocos millones de glóbulos blancos y mil millones de glóbulos rojos. Esta baja frecuencia, asociada a la dificultad de identificar las células cancerosas, significa que un componente clave para comprender las propiedades biológicas de las CTC requiere tecnologías y enfoques capaces de aislar 1 CTC por mL de sangre, ya sea mediante enriquecimiento o, mejor aún, con ensayos sin enriquecimiento que identifiquen todos los subtipos de CTC con una definición lo suficientemente alta como para satisfacer los requisitos de cantidad de imágenes de patología diagnóstica en pacientes con diversos tipos de cáncer.[19]​ Hasta la fecha, se han detectado CTC en varios tipos de cáncer epitelial (mama, próstata, pulmón y colon)[30]​[31]​[32]​[33]​ y las pruebas clínicas indican que los pacientes con lesiones metastásicas tienen más probabilidades de que se aíslen CTC en ellos.

Las CTC se suelen capturar (en 2011) en la vasculatura de los pacientes utilizando anticuerpos específicos capaces de reconocer un marcador tumoral específico (normalmente EpCAM, Epithelial Cell Adhesion Molecule); sin embargo, este enfoque está sesgado por la necesidad de una expresión suficiente de la proteína seleccionada en la superficie celular, evento necesario para el paso de enriquecimiento. Además, dado que EpCAM y otras proteínas (por ejemplo, las citoqueratinas) no se expresan en algunos tumores y pueden ser reguladas a la baja durante la transición epitelial a mesenquimal (EMT), se requieren nuevas estrategias de enriquecimiento. [34]​

Las primeras pruebas indican que los marcadores de CTC aplicados en medicina humana se conservan en otras especies. Cinco de los marcadores más comunes, incluido el CK19, también son útiles para detectar CTC en la sangre de perros con tumores mamarios malignos.[35]​[36]​ Enfoques más recientes son capaces de identificar más células partiendo de 7,5 ml de sangre, estando IsofFux o Maintracentre dichas novedades.[37]​[38]​ En muy raras ocasiones, las CTC están presentes en cantidades lo suficientemente grandes como para ser visibles en un frotis sanguíneo rutinario. Esto se conoce como carcinocitemia o leucemia de células carcinomatosas y se asocia con un mal pronóstico.[39]​

Métodos de detección

Análisis Kaplan-Meier de supervivencia global antes de iniciar una nueva línea de tratamiento en pacientes con cáncer metastásico de mama, colorrectal y de próstata. Los pacientes se dividieron en aquellos con CTC Favorable y Desfavorable (Desfavorable: >5 CTC/7,5mL para mama y próstata, >3 CTC/7,5mL para colon)[29]​

.

Hasta la fecha, se han desarrollado diversos métodos de investigación para aislar y enumerar las CTC.[40]​ La única metodología aprobada por la Food and Drug Administration (FDA) estadounidense para la enumeración de CTC en sangre total es el sistema CellSearch.[41]​ Las pruebas clínicas exhaustivas realizadas con este método demuestran que la presencia de CTC es un factor pronóstico importante para la supervivencia general en pacientes con cáncer de mama, colorrectal o de próstata metastásico.[8]​[42]​[43]​[44]​[45]​[46]​[47]​

Las CTC son fundamentales para comprender la biología de la metástasis y prometen un potencial como biomarcadores que permitan evaluar de forma no invasiva la progresión tumoral y la respuesta al tratamiento. Sin embargo, el aislamiento y la caracterización de las CTC representan un reto tecnológico importante, ya que las CTC constituyen un número ínfimo del total de células de la sangre circulante, de 1 a 10 CTC por mL de sangre total en comparación con unos pocos millones de glóbulos blancos y mil millones de glóbulos rojos.[48]​ Por lo tanto, el mayor reto para los investigadores en este campo es la dificultad predominante para la purificación de CTC que permitan la caracterización molecular de las mismas. Se han desarrollado varios métodos para aislar las CTC en la sangre periférica y se dividen esencialmente en dos categorías: métodos biológicos y métodos físicos, así como métodos híbridos que combinan ambas estrategias. Las técnicas también pueden clasificarse en función de si seleccionan las CTC para su aislamiento (selección positiva) o si excluyen todas las restantes células sanguíneas (selección negativa).

Métodos biológicos

Los métodos biológicos aíslan las células basándose en la unión a antígenos altamente específicos, normalmente mediante anticuerpos monoclonales para la selección positiva. Se han utilizado anticuerpos contra biomarcadores tumorales específicos, como EpCAM, HER2 y PSA. La técnica más común es la separación basada en nanopartículas magnéticas (ensayo inmunomagnético), como la utilizada en CellSearch o MACS. Otras técnicas en investigación incluyen la separación microfluídica[49]​ y la combinación de ensayo inmunomagnético y separación microfluídica.[50]​[51]​[52]​[53]​ A medida que se desarrolla la tecnología de microfabricación, se implementan estructuras magnéticas a microescala para proporcionar un mejor control del campo magnético y ayudar a la detección de CTCs.[54]​[55]​[56]​

Virus oncolíticos como los virus vaccinia[57]​ se han desarrollado para detectar e identificar CTCs. Existen métodos alternativos que utilizan proteínas de ingeniería biológica en lugar de anticuerpos, como la proteína VAR2CSA de la malaria, que se une al condroitín sulfato oncofetal en la superficie de los CTC.[58]​ Las CTC también pueden extraerse directamente de la sangre mediante una técnica Seldinger modificada, como la desarrollada por GILUPI GmbH.[59]​[60]​ Se introduce un alambre metálico recubierto de anticuerpos en una vena periférica y permanece allí durante un periodo definido (30 minutos). Durante este tiempo, las CTC de la sangre pueden unirse a los anticuerpos (actualmente anti-EpCAM). Una vez transcurrido el tiempo de incubación, se retira el cable, se lava y las CTC nativas, aisladas de la sangre del paciente, pueden seguir analizándose. La genética molecular, así como la tinción inmunofluorescente y otros varios métodos son posibles.[61]​[62]​ La ventaja de este método es el mayor volumen de sangre que se puede analizar en busca de CTC (aproximadamente 750 ml en 30 minutos en comparación con los 7,5 ml de una muestra de sangre extraída).

Método CellSearch

CellSearch es la única plataforma aprobada por la FDA para el aislamiento de CTC. Este método se basa en el uso de nanopartículas de hierro recubiertas con una capa polimérica portadora de análogos de biotina y conjugadas con anticuerpos contra EpCAM para la captura de CTC. El aislamiento se acopla a un analizador para tomar imágenes de las células aisladas tras su tinción con conjugados de anticuerpos fluorescentes específicos. La sangre se extrae en un tubo EDTA con un conservante añadido. Al llegar al laboratorio, se centrifugan 7,5mL de sangre y se colocan en un sistema de preparación. Este sistema enriquece primero inmunomagnéticamente las células tumorales mediante nanopartículas de ferrofluido y un imán. Posteriormente, las células recuperadas se permeabilizan y se tiñen con una tinción nuclear, un anticuerpo fluorescente conjugado contra CD45 (marcador leucocitario) y citoqueratinas CK8, CK18 y CK19 (marcadores epiteliales). A continuación, la muestra se escanea en un analizador que toma imágenes de las tinciones nuclear, de citoqueratina y CD45.[63]​ Para ser considerada una CTC, una célula debe contener un núcleo, ser positiva para la expresión citoplasmática de la citoqueratina, así como negativa para la expresión del marcador CD45, y tener un diámetro superior a 5 μm. Si el número total de células tumorales que cumplen los criterios citados es de 5 o más, la muestra de sangre es positiva. En estudios realizados en pacientes con cáncer de próstata, mama y colon, la mediana de supervivencia de los pacientes metastásicos con muestras positivas es aproximadamente la mitad de la mediana de supervivencia de los pacientes metastásicos con muestras negativas. Este sistema se caracteriza por una capacidad de recuperación del 93% y un límite de detección de una CTC por cada 7,5 mL de sangre total. Para tipos específicos de cáncer, métodos alternativos como IsoFlux han mostrado una mayor sensibilidad.[64]​

Método Parsortix

Este método automatizado utiliza la filtración por tamaño para enriquecer las células tumorales circulantes más grandes y menos compresibles de otros componentes sanguíneos. El sistema Parsortix puede tomar muestras de sangre de entre 1 mL y 40 mL. Un casete microfluídico desechable con una separación de 6,5 micras permite el paso de la gran mayoría de los glóbulos rojos y blancos, mientras que las células raras de mayor tamaño, incluidas las células tumorales circulantes y las células fetales, quedan atrapadas. Las células atrapadas pueden teñirse automáticamente con anticuerpos para su identificación o pueden liberarse del casete para su posterior análisis. Estas células liberadas/recogidas están vivas y pueden analizarse mediante técnicas celulares y moleculares posteriores, así como cultivarse. El casete de filtración captura una plétora de diferentes tipos de células cancerosas. En mayo de 2022, el sistema Parsortix PC1 fue autorizado por la FDA como dispositivo médico para la captura y recolección de células tumorales circulantes (CTC) de sangre de pacientes con cáncer de mama metastásico para su posterior análisis. Además de la aplicación IVD, el PC1 puede utilizarse con el kit MBC-01 para cáncer de mama metastásico para su uso en estudios de investigación o pruebas desarrolladas en laboratorio (LDT) que hayan sido creadas y validadas en un laboratorio clínico.

Método de Epic Sciences

Este método utiliza tecnología para separar las células nucleadas, por un lado, y los glóbulos rojos, que carecen de núcleo, por otro lado. Todas las células nucleadas, incluidos los glóbulos blancos normales y los CTC, se exponen a anticuerpos marcados con fluorescencia específicos para biomarcadores de cáncer. Además, el sistema de imágenes de Epic captura imágenes de todas las células del portaobjetos (aproximadamente 3 millones), registra las coordenadas precisas de cada célula y analiza cada célula en función de 90 parámetros diferentes, incluida la intensidad de fluorescencia de los cuatro marcadores fluorescentes y 86 parámetros morfológicos diferentes. Epic también puede utilizar Hibridación fluorescente in situ (FISH) y otras técnicas de tinción para buscar anomalías como duplicaciones, deleciones y reordenamientos. La tecnología de imagen y análisis también permite conocer las coordenadas de cada célula de un portaobjetos, de modo que se puede recuperar una sola célula del portaobjetos para analizarla mediante secuenciación de nueva generación. Un algoritmo entrenado en hematopatología incorpora numerosas mediciones morfológicas, así como la expresión de citoqueratina y CD45. A continuación, el algoritmo propone CTC candidatas que un lector entrenado confirma. Las células de interés se analizan en busca de marcadores fenotípicos y genotípicos relevantes, con glóbulos blancos regionales incluidos como controles negativos.[65]​ Los ensayos moleculares de Epic miden la expresión de proteínas y también examinan las anomalías genómicas en las CTC de más de 20 tipos de cáncer diferentes.

Método Maintrac

Maintrac es una plataforma de prueba diagnóstica de sangre que aplica métodos de diagnóstico microscópico in vitro para identificar células raras en fluidos corporales y sus características moleculares. Se basa en la selección positiva mediante anticuerpos EpCAM específicos.[66]​ Maintrac utiliza un enfoque basado en la identificación microscópica de las células tumorales circulantes. Para evitar el daño y la pérdida de las células durante el proceso, utiliza sólo dos pasos para la identificación. A diferencia de muchos otros métodos, Maintrac no purifica las células ni las enriquece, sino que las identifica en el contexto de los demás compuestos sanguíneos. Para obtener células vitales y reducir el estrés de las mismas, las células sanguíneas se preparan mediante un único paso de centrifugación y lisis eritrocitaria. Al igual que CellSearch, el método Maintrac utiliza un anticuerpo EpCAM. Sin embargo, no se utiliza para el enriquecimiento, sino como marcador fluorescente para identificar esas células. Junto con la tinción nuclear con yoduro de propidio, el método Maintrac puede distinguir entre células vivas y muertas. Sólo las células vitales, positivas para EpCAM y excluyentes del propidio, se cuentan como células tumorales potenciales. Sólo las células vivas pueden convertirse en tumores, por lo que las células EpCAM positivas moribundas no pueden causar ningún daño. La suspensión se analiza mediante microscopía de fluorescencia, que cuenta automáticamente los eventos. Se registran galerías de eventos simultáneos para verificar si el software ha encontrado una verdadera célula viva y diferenciarlas de las células epiteliales de la piel, por ejemplo. La validación minuciosa del método demostró que los anticuerpos adicionales de citoqueratinas o CD45 no presentaban ninguna ventaja.[38]​[67]​

A diferencia de otros métodos, Maintrac no utiliza el recuento de una sola célula como marcador pronóstico, sino que utiliza la dinámica del recuento celular. El aumento del número de células tumorales es un factor importante de que la actividad tumoral está en curso. [68]​ La disminución del número de células es un signo de éxito de la terapia. Por lo tanto, el método Maintrac puede utilizarse para verificar el éxito de una quimioterapia[38]​[69]​ y para supervisar el tratamiento durante la quimioterapia neoadyuvante (quimioterapia sistémica primaria) en el cáncer de mama.[38]​[70]​ y supervisar el tratamiento durante la terapia hormonal o de mantenimiento[71]​[72]​

Maintrac se ha utilizado experimentalmente para controlar la recurrencia del cáncer.[73]​[74]​ Los estudios realizados con Maintrac han demostrado que pueden encontrarse células EpCAM positivas en la sangre en pacientes sin cáncer. [75]​

Las afecciones inflamatorias como la enfermedad de Crohn también muestran niveles elevados de células EpCAM positivas. Los pacientes con quemaduras graves en la piel también pueden tener células EpCAM positivas en la sangre. Por lo tanto, el uso de células EpCAM-positivas como herramienta para el diagnóstico precoz no es óptimo.

Métodos físicos

Los métodos físicos suelen basarse en filtros, lo que permite la captura de CTC por tamaño en lugar de por epítopos específicos.[16]​ ScreenCell es un dispositivo basado en filtración que permite el aislamiento sensible y específico de CTC de sangre total humana en pocos minutos.[76]​ La sangre periférica se extrae y procesa en 4 horas con un dispositivo de aislamiento ScreenCell para capturar CTC. Las células capturadas están listas para el cultivo celular o para la caracterización directa mediante el ensayo de hibridación in situ, ViewRNA. El método Parsortix separa las CTC en función de su tamaño y deformabilidad.[77]​

Métodos híbridos

Los métodos híbridos combinan la separación física (por gradientes, campos magnéticos, etc.) con la recuperación celular mediada por anticuerpos. Un ejemplo de ello es un método sensible de detección y enumeración por centrifugación en doble gradiente y clasificación celular magnética que se ha utilizado para detectar células cancerosas epiteliales circulantes en pacientes con cáncer de mama mediante selección negativa.[78]​ El principio de selección negativa se basa en la recuperación de todas las células sanguíneas mediante el uso de un panel de anticuerpos, así como la centrifugación en gradiente tradicional con Ficoll. Un método similar conocido como Prueba ISET se ha empleado para detectar células circulantes de cáncer de próstata[79]​[80]​[81]​ y se ha utilizado otra técnica conocida como RosetteStep para aislar CTC de pacientes con cáncer de pulmón microcítico. [82]​ De forma similar, investigadores del Hospital General de Massachusetts han desarrollado un método de selección negativa que emplea el enfoque inercial en un dispositivo microfluídico. La técnica, denominada CTC-iChip, elimina primero las células demasiado pequeñas para ser CTC, como los glóbulos rojos, y después utiliza partículas magnéticas para eliminar los glóbulos blancos. [83]​

Caracterización de las CTC

Algunos fármacos son especialmente eficaces contra cánceres que cumplen ciertos requisitos. Por ejemplo, Herceptin es muy eficaz en pacientes que son Her2 positivos, pero mucho menos eficaz en pacientes que son Her2 negativos. Una vez extirpado el tumor primario, la biopsia del estado actual del cáncer mediante la tipificación tisular tradicional ya no es posible. [84]​ A menudo se utilizan secciones de tejido del tumor primario, extirpadas años antes, para realizar la tipificación. Una mayor caracterización de las CTC puede ayudar a determinar el fenotipo tumoral actual. Se han realizado ensayos FISH en CTC así como la determinación del estado del IGF-1R, Her2, Bcl-2, ERG, PTEN y AR mediante inmunofluorescencia.[7]​[85]​[86]​[87]​[88]​

El tropismo orgánico de las CTC derivadas de pacientes se ha investigado en un modelo de ratón. [89]​ Las CTC aisladas de pacientes con cáncer de mama y expandidas in vitro mostraron que podían generar metástasis óseas, pulmonares, ováricas y cerebrales en ratones, reflejando parcialmente las lesiones secundarias encontradas en las pacientes correspondientes. Sorprendentemente, una línea de CTC -aislada mucho antes de la aparición de metástasis cerebrales en la paciente- era altamente competente para generar metástasis cerebrales en ratones. Este fue el primer caso predictivo de metástasis cerebral y una prueba de concepto de que las características moleculares intrínsecas de los precursores metastásicos entre las CTC podrían proporcionar nuevos conocimientos sobre los mecanismos de la metástasis.

Morfología celular

La apariencia morfológica es juzgada por operadores humanos y, por lo tanto, está sujeta a una gran variación entre operadores. [90]​ Existen varios métodos de enumeración de CTC que utilizan la apariencia morfológica para identificar CTC, que también pueden aplicar diferentes criterios morfológicos. Un estudio reciente en cáncer de próstata demostró que muchas definiciones morfológicas diferentes de células tumorales circulantes tienen un valor pronóstico similar, a pesar de que el número absoluto de células encontradas en pacientes y donantes normales variaba en más de una década entre las diferentes definiciones morfológicas.[91]​

Historia

Las CTCs fueron observadas por primera vez en 1869 en la sangre de un hombre con cáncer metastásico por Thomas Ashworth, quien postuló que "las células idénticas a las del propio cáncer que se ven en la sangre pueden tender a arrojar alguna luz sobre el modo de origen de múltiples tumores existentes en la misma persona". Una comparación minuciosa de la morfología de las células circulantes con las células tumorales de diferentes lesiones llevó a Ashworth a concluir que "una cosa es cierta, que si las [CTC] procedían de una estructura cancerosa existente, debían haber atravesado la mayor parte del sistema circulatorio para haber llegado a la vena safena interna de la pierna sana".[92]​

La importancia de las CTC en la investigación moderna del cáncer comenzó a mediados de la década de 1990 con la demostración de que las CTC ya existen en una fase temprana del curso de la enfermedad. [93]​ Estos resultados fueron posibles gracias a una tecnología de separación magnética exquisitamente sensible que empleaba ferrofluidos (nanopartículas magnéticas coloidales) y separadores magnéticos de alto gradiente inventados por Paul Liberti y motivados por los cálculos teóricos de Liberti y Leon Terstappen que indicaban que los tumores muy pequeños que desprendían células a un ritmo menor del 1,0% al día deberían dar lugar a células detectables en sangre.[94]​ Desde entonces se han aplicado otras tecnologías a la enumeración e identificación de CTC.

La investigación oncológica moderna ha demostrado que las CTC derivan de clones del tumor primario, validando las observaciones de Ashworth. [95]​ Los importantes esfuerzos realizados para comprender las propiedades biológicas de las CTC han demostrado el papel fundamental que desempeñan las células tumorales circulantes en la propagación metastásica del carcinoma. [96]​ Además, el análisis unicelular de alta sensibilidad demostró un alto nivel de heterogeneidad observado a nivel unicelular tanto para la expresión como para la localización de proteínas[97]​ y las CTC reflejaban tanto la biopsia primaria como los cambios observados en las localizaciones metastásicas.[98]​

Referencias

  1. ↑ a b Arvelo, F; Sojo, F; Cotte, C (2016). «Cancer and the metastatic substrate.». Ecancermedicalscience 10: 701. PMID 28105072. doi:10.3332/ecancer.2016.701. 
  2. ↑ Riquet, M; Rivera, C; Gibault, L; Pricopi, C; Mordant, P; Badia, A; Arame, A; Le Pimpec Barthes, F (2014). «Lymphatic spread of lung cancer: anatomical lymph node chains unchained in zones». Revue de Pneumologie Clinique 70 (1-2): 16-25. PMID 24566031. doi:10.1016/j.pneumo.2013.07.001. 
  3. ↑ Gupta, GP.; Massagué, J. (17 de noviembre de 2006). «Cancer metastasis: building a framework». Cell 127 (4): 679-695. PMID 17110329. S2CID 7362869. doi:10.1016/j.cell.2006.11.001. 
  4. ↑ Rack B, Schindlbeck C, Jückstock J, Andergassen U, Hepp P, Zwingers T, Friedl T, Lorenz R, Tesch H, Fasching P, Fehm T, Schneeweiss A, Lichtenegger W, Beckmann M, Friese K, Pantel K, Janni W (2014). «Circulating Tumor Cells Predict Survival in Early Average-to-High Risk Breast Cancer Patients». Journal of the National Cancer Institute 106 (5). PMC 4112925. PMID 24832787. doi:10.1093/jnci/dju066. 
  5. ↑ Millner, LM; Linder, MW; Valdes R, Jr (Verano 2013). «Circulating tumor cells: a review of present methods and the need to identify heterogeneous phenotypes.». Annals of Clinical and Laboratory Science 43 (3): 295-304. PMC 5060940. PMID 23884225. 
  6. ↑ Marrinucci, D; Bethel, K; Luttgen, M; Nieva, J; Kuhn, P; Kuhn, P (Sep 2009). «Circulating tumor cells from well-differentiated lung adenocarcinoma retain cytomorphologic features of primary tumor type r». Archives of Pathology & Laboratory Medicine 133 (9): 1468-71. PMC 4422331. PMID 19722757. doi:10.5858/133.9.1468. 
  7. ↑ a b Attard G, Swennenhuis JF, Olmos D, Reid AH, Vickers E, A'Hern R, Levink R, Coumans F, Moreira J, Riisnaes R, Oommen NB, Hawche G, Jameson C, Thompson E, Sipkema R, Carden CP, Parker C, Dearnaley D, Kaye SB, Cooper CS, Molina A, Cox ME, Terstappen LW, de Bono JS (2009). «Characterization of ERG, AR and PTEN gene status in circulating tumor cells from patients with castration-resistant prostate cancer». Cancer Res. 69 (7): 2912-8. PMID 19339269. doi:10.1158/0008-5472.CAN-08-3667. 
  8. ↑ a b Cohen SJ, Punt CJ, Iannotti N, Saidman BH, Sabbath KD, Gabrail NY, Picus J, Morse M, Mitchell E, Miller MC, Doyle GV, Tissing H, Terstappen LW, Meropol NJ (2008). «Relationship of circulating tumor cells to tumor response, progression-free survival, and overall survival in patients with metastatic colorectal cancer». J. Clin. Oncol. 26 (19): 3213-21. PMID 18591556. doi:10.1200/JCO.2007.15.8923. 
  9. ↑ Yu M, Ting DT, Stott SL, Wittner BS, Ozsolak F, Paul S, Ciciliano JC, Smas ME, Winokur D, Gilman AJ, Ulman MJ, Xega K, Contino G, Alagesan B, Brannigan BW, Milos PM, Ryan DP, Sequist LV, Bardeesy N, Ramaswamy S, Toner M, Maheswaran S, Haber DA (2012). «RNA sequencing of pancreatic circulating tumour cells implicates WNT signalling in metastasis». Nature 487 (7408): 510-3. Bibcode:..510Y 2012Natur.487 ..510Y. PMC 3408856. PMID 22763454. doi:10.1038/nature11217. 
  10. ↑ Sleijfer S, Gratama JW, Sieuwerts AM (2007). «Circulating tumour cell detection on its way to routine diagnostic implementation?». Eur J Cancer 43 (18): 2645-50. PMID 17977713. doi:10.1016/j.ejca.2007.09.016. 
  11. ↑ Hayes DF, Smerage J.; Smerage (2008). «Is There a Role for Circulating Tumor Cells in the Management of Breast Cancer?». Clin Cancer Res 14 (12): 3646-50. PMID 18559576. doi:10.1158/1078-0432.CCR-07-4481. 
  12. ↑ Pantel K, Alix-Panabières C, Riethdorf S (2009). «Cancer micrometastases». Nat Rev Clin Oncol 6 (6): 339-51. PMID 19399023. S2CID 890927. doi:10.1038/nrclinonc.2009.44. 
  13. ↑ Pantel K, Riethdorf S.; Riethdorf (2009). «Pathology: are circulating tumor cells predictive of overall survival?». Nature Reviews Clinical Oncology 6 (4): 190-1. PMID 19333222. S2CID 8904131. doi:10.1038/nrclinonc.2009.23. 
  14. ↑ Panteleakou Z, Lembessis P, Sourla A (2009). «Detection of circulating tumor cells in prostate cancer patients: methodological pitfalls and clinical relevance». Mol Med 15 (3–4): 101-14. PMC 2600498. PMID 19081770. doi:10.2119/molmed.2008.00116. 
  15. ↑ Esmaeilsabzali H, Beischlag TV, Cox ME, Parameswaran AM, Park EJ (2013). «Detection and isolation of circulating tumor cells: principles and methods». Biotechnol. Adv. 31 (7): 1063-84. PMID 23999357. doi:10.1016/j.biotechadv.2013.08.016. 
  16. ↑ a b Nieva, J; Wendel, M; Luttgen, MS; Marrinucci, D; Bazhenova, L; Kolatkar, A; Santala, R; Whittenberger, B; Burke, J; Torrey, M; Bethel, K; Kuhn, P (Feb 2012). «Imágenes de alta definición de células tumorales circulantes y eventos celulares asociados en pacientes con cáncer de pulmón no microcítico: un análisis longitudinal». Physical Biology 9 (1): 016004. Bibcode:..9a6004N 2012PhBio. ..9a6004N. PMC 3388002. PMID 22306961. doi:10.1088/1478-3975/9/1/016004. 
  17. ↑ Hong, Yupeng; Fang, Francia; Zhang, Qi (Diciembre 2016). «Circulating tumor cell clusters: What we know and what we expect (Review)». International Journal of Oncology 49 (6): 2206-2216. PMC 5117994. PMID 27779656. doi:10.3892/ijo.2016.3747. 
  18. ↑ Racila, E; Euhus, D; Weiss, AJ; Rao, C; McConnell, J; Terstappen, LW; Uhr, JW (Abr 1998). «Detection and characterization of carcinoma cells in the blood». Proceedings of the National Academy of Sciences 95 (8): 4589-4594. Bibcode:1998PNAS...95.4589R. PMC 22534. PMID 9539782. doi:10.1073/pnas.95.8.4589. 
  19. ↑ a b c Marrinucci, Dena; Bethel, Kelly; Kolatkar, Anand; Luttgen, Madelyn; Malchiodi, Michael; Baehring, Franziska; Voigt, Katharina; Lazar, Daniel; Nieva, Jorge; Bazhenova, Lyudmilda; Ko, Andrew; Korn, W. Michael; Schram, Ethan; Coward, Michael; Yang, Xing; Metzner, Thomas; Lamy, Rachelle; Honnatti, Meghana; Yoshioka, Craig; Kunken, Joshua; Petrova, Yelena; Sok, Devin; Nelson, David; Kuhn, Peter (Feb 2012). «Fluid Biopsy in Patients with Metastatic Prostate, Pancreatic and Breast Cancers». Physical Biology 9 (1): 016003. Bibcode:2012PhBio...9a6003M. PMC 3387996. PMID 22306768. doi:10.1088/1478-3975/9/1/016003. 
  20. ↑ Ferraldeschi, Roberta; McDaniel, Andrew; Krupa, Rachel; Louw, Jessica; Tucker, Eric; Bales, Natalee; Marrinucci, Dena; Riisnaes, Ruth; Mateo, Joaquin; Dittamore, Ryan; De Bono, Johann Sebastian; Tomlins, Scott A.; Attard, Gerhardt (Febrero 2014). «CK- and small nuclear size circulating tumor cell (CTCs) phenotypes in metastatic castration-resistant prostate cancer (mCRPC).». Journal of Clinical Oncology 32 (4_suppl): 209. doi:10.1200/jco.2014.32.4_suppl.209. 
  21. ↑ a b Rapanotti MC, Cenci T, Scioli MG, Cugini E, Anzillotti S, Savino L, Coletta D, Di Raimondo C, Campione E, Roselli M, Bernardini S, Bianchi L, De Luca A, Ferlosio A, Orlandi A (September 2024). «Circulating Tumor Cells: Origin, Role, Current Applications, and Future Perspectives for Personalized Medicine». Biomedicines 12 (9): 2137. PMC 11429165. PMID 39335650. doi:10.3390/biomedicines12092137. 
  22. ↑ a b Aceto N, Bardia A, Miyamoto DT, Donaldson MC, Wittner BS, Spencer JA, Yu M, Pely A, Engstrom A, Zhu H, Brannigan BW, Kapur R, Stott SL, Shioda T, Ramaswamy S, Ting DT, Lin CP, Toner M, Haber DA, Maheswaran S (2014). «Circulating tumor cell clusters are oligoclonal precursors of breast cancer metastasis». Cell 158 (5): 1110-22. PMC 4149753. PMID 25171411. doi:10.1016/j.cell.2014.07.013. 
  23. ↑ Divella R, Daniele A, Abbate I, Bellizzi A, Savino E, Simone G, Giannone G, Giuliani F, Fazio V, Gadaleta-Caldarola G, Gadaleta C, Lolli I, Sabbà C, Mazzocca A (2014). «The presence of clustered circulating tumor cells (CTCs) and circulating cytokines define an aggressive phenotype in metastatic colorectal cancer». Cancer Causes Control 25 (11): 1531-41. PMID 25135616. S2CID 16377917. doi:10.1007/s10552-014-0457-4. 
  24. ↑ a b Schuster, Emma; Taftaf, Rokana; Reduzzi, Carolina; Albert, Mary K.; Romero-Calvo, Isabel; Liu, Huiping (Noviembre 2021). «Better together: circulating tumor cell clustering in metastatic cancer». Trends in Cancer 7 (11): 1020-1032. PMC 8541931. PMID 34481763. doi:10.1016/j.trecan.2021.07.001. 
  25. ↑ Au S, Storey B, Moore J, Tang Q, Chen Y, Javaid S, Sarioglu A, Sullivan R, Madden M, O'Keefe R, Haber D, Maheswaran S, Langenau D, Stott S, Toner M (2016). «Clusters of circulating tumor cells traverse capillary-sized vessels». Proceedings of the National Academy of Sciences 113 (18): 4937-52. Bibcode:2016PNAS..113.4947A. PMC 4983862. PMID 27091969. doi:10.1073/pnas.1524448113. 
  26. ↑ {Allen, Tyler A. (2021). «A Zebrafish Model of Metastatic Colonization Pinpoints Cellular Mechanisms of Circulating Tumor Cell Extravasation». Frontiers in Oncology 11: 641187. PMC 8495265. PMID 34631514. doi:10.3389/fonc.2021.641187. 
  27. ↑ Ghossein RA, Bhattacharya S, Rosai J (1999). «Molecular detection of micrometastases and circulating tumor cells in solid tumors». Clin. Cancer Res. 5 (8): 1950-60. PMID 10473071. 
  28. ↑ Zhe, X; Cher M.L.; Bonfil R.D. (2011). «Circulating tumor cells: finding the needle in the haystack». Am J Cancer Res 1 (6): 740-751. PMC 3195935. PMID 22016824. 
  29. ↑ a b Miller MC, Doyle GV, Terstappen LW (2010). «Significance of Circulating Tumor Cells Detected by the CellSearch System in Patients with Metastatic Breast Colorectal and Prostate Cancer». J Oncol 2010: 1-8. PMC 2793426. PMID 20016752. doi:10.1155/2010/617421. 
  30. ↑ Swaby, RF; Cristofanilli, M (Apr 21, 2011). «Circulating tumor cells in breast cancer: a tool whose time has come of age». BMC Medicine 9: 43. PMC 3107794. PMID 21510857. doi:10.1186/1741-7015-9-43. 
  31. ↑ Danila, DC; Fleisher, M; Scher, HI (15 de junio de 2011). «Circulating tumor cells as biomarkers in prostate cancer». Clinical Cancer Research 17 (12): 3903-12. PMC 3743247. PMID 21680546. doi:10.1158/1078-0432.CCR-10-2650. 
  32. ↑ Tanaka F, Yoneda K, Kondo N, Hashimoto M, Takuwa T, Matsumoto S, Okumura Y, Rahman S, Tsubota N, Tsujimura T, Kuribayashi K, Fukuoka K, Nakano T, Hasegawa S (2009). «Circulating tumor cell as a diagnostic marker in primary lung cancer». Clin. Cancer Res. 15 (22): 6980-6. PMID 19887487. doi:10.1158/1078-0432.CCR-09-1095. 
  33. ↑ Negin, BP; Cohen, SJ (Jun 2010). «Circulating tumor cells in colorectal cancer: past, present, and future challenges». Current Treatment Options in Oncology 11 (1-2): 1-13. PMID 20143276. S2CID 11881681. doi:10.1007/s11864-010-0115-3. 
  34. ↑ Mikolajczyk, SD; Millar, LS; Tsinberg, P; Coutts, SM; Zomorrodi, M; Pham, T; Bischoff, FZ; Pircher, TJ (2011). «Detection of EpCAM-Negative and Cytokeratin-Negative Circulating Tumor Cells in Peripheral Blood». Journal of Oncology 2011: 1-10. PMC 3090615. PMID 21577258. doi:10.1155/2011/252361. 
  35. ↑ da Costa A, Oliveira JT, Gärtner F, Kohn B, Gruber AD, Klopfleisch R (2011). «Potential markers for detection of circulating canine mammary tumor cells in the peripheral blood». Vet. J. 190 (1): 165-8. PMID 21051248. doi:10.1016/j.tvjl.2010.09.027. 
  36. ↑ da Costa, A (2013). «Multiple RT-PCR markers for the detection of circulating tumour cells of metastatic canine mammary tumours». Veterinary Journal 196 (1): 34-39. PMID 23036177. doi:10.1016/j.tvjl.2012.08.021. 
  37. ↑ Harb, W.; Fan, A.; Tran, T.; Danila, D. C.; Keys, D.; Schwartz, M.; y Ionescu-Zanetti, C. (2013). «Mutational Analysis of Circulating Tumor Cells Using a Novel Microfluidic Collection Device and qPCR Assay». Transl. Oncol. 6 (5): 528-538. PMC 3799195. PMID 24151533. doi:10.1593/tlo.13367. 
  38. ↑ a b c d Pachmann K.; Camara O.; Kavallaris A.; Krauspe S.; Malarski N.; Gajda M.; Kroll T.; Jorke C.; Hammer U.; Altendorf-Hofmann A. (2008). «Monitoring the Response of Circulating Epithelial Tumor Cells to Adjuvant Chemotherapy in Breast Cancer Allows Detection of Patients at Risk of Early Relapse». J. Clin. Oncol. 26 (8): 1208-1215. PMID 18323545. S2CID 20074388. doi:10.1200/JCO.2007.13.6523. 
  39. ↑ Ronen, Shira; Kroft, Steven H.; Olteanu, Horatiu; Hosking, Paul R.; Harrington, Alexandra M. (2019). «Carcinocythemia: A rare entity becoming more common? A 3-year, single institution series of seven cases and literature review». International Journal of Laboratory Hematology 41 (1): 69-79. ISSN 1751-5521. PMID 30216684. doi:10.1111/ijlh.12924. 
  40. ↑ Paterlini-Brechot P, Benali NL.; Benali (2007). «Circulating tumor cells (CTC) detection: Clinical impact and future directions». Cancer Lett. 253 (2): 180-204. PMID 17314005. doi:10.1016/j.canlet.2006.12.014. 
  41. ↑ «Veridex CellSearch Website». Marzo de 2010. Archivado desde el original el 5 de junio de 2008. Consultado el 14 de marzo de 2010. 
  42. ↑ «Veridex LLC. CellSearch circulating tumor cell kit premarket notification-expanded indications for use-metastatic prostate cancer». Food and Drug Administration. Marzo 2010. Consultado el 14 de marzo de 2010. 
  43. ↑ Cristofanilli M, Budd GT, Ellis MJ (2004). «Circulating Tumor Cells, Disease Progression and Survival in Metastatic Breast Cancer». NEJM 351 (8): 781-91. PMID 15317891. S2CID 7445998. doi:10.1056/NEJMoa040766. 
  44. ↑ Budd G, Cristofanilli M, Ellis M (2006). «Circulating Tumor Cells versus Imaging - Predicting Overall Survival in Metastatic Breast Cancer». Clin Cancer Res 12 (21): 6404-09. PMID 17085652. doi:10.1158/1078-0432.CCR-05-1769. 
  45. ↑ JS DeBono; HI Scher; RB Montgomery (2008). «Circulating Tumor Cells (CTC) predict survival benefit from treatment in metastatic castration resistant prostate cancer (CRPC))». Clin Cancer Res 14 (19): 6302-9. PMID 18829513. doi:10.1158/1078-0432.CCR-08-0872. 
  46. ↑ Allard WJ, Matera J, Miller MC (2004). «Las células tumorales circulan en la sangre periférica de todos los carcinomas importantes pero no en sujetos sanos o pacientes con enfermedades no malignas». Clin Cancer Res 10 (20): 6897-6904. PMID 15501967. doi:10.1158/1078-0432.1158/1078-0432.CCR-04-0378. 
  47. ↑ Riethdorf; Fritsche, H; Müller, V; Rau, T; Schindlbeck, C; Rack, B; Janni, W; Coith, C et al. (2007). «Detection of Circulating Tumor Cells in Peripheral Blood of Patients with Metastatic Breast Cancer: A Validation Study of the CellSearch System». Clin Cancer Res 13 (3): 920-8. PMID 17289886. doi:10.1158/1078-0432.CCR-06-1695. 
  48. ↑ Yu M. et al. (2011). «Circulating tumor cells: approaches to isolation and characterization». The Journal of Cell Biology 192 (3): 373-382. PMC 3101098. PMID 21300848. doi:10.1083/jcb.201010021. 
  49. ↑ Nagrath, Sunitha; Sequist, Lecia V.; Maheswaran, Shyamala; Bell, Daphne W.; Irimia, Daniel; Ulkus, Lindsey; Smith, Matthew R.; Kwak, Eunice L.; Digumarthy, Subba; Muzikansky, Alona; Ryan, Paula; Balis, Ulysses J.; Tompkins, Ronald G.; Haber, Daniel A.; Toner, Mehmet (Diciembre 2007). «Isolation of rare circulating tumour cells in cancer patients by microchip technology». Nature 450 (7173): 1235-1239. Bibcode:.1235N 2007Natur.450 .1235N. PMC 3090667. PMID 18097410. doi:10.1038/nature06385. 
  50. ↑ Hoshino, Kazunori; Huang, Yu-Yen; Lane, Nancy; Huebschman, Michael; Uhr, Jonathan W.; Frenkel, Eugene P.; Zhang, Xiaojing (Octubre de 2011). «Microchip-based immunomagnetic detection of circulating tumor cells». Lab on a Chip 11 (20): 3449-3457. PMC 3379551. PMID 21863182. doi:10.1039/c1lc20270g. 
  51. ↑ Peng, Chen; Yu-yen, Huang; Hoshino, Kazunori; Xiaojing, Zhang (2014). «Multiscale immunomagnetic enrichment of circulating tumor cells: from tubes to microchips». Lab on a Chip 14 (3): 446-458. PMID 24292816. S2CID 205863853. doi:10.1039/C3LC51107C. 
  52. ↑ Huang, Yu-yen; Hoshino, Kazunori; Chen, Peng; Wu, Chun- hsien; Lane, Nancy; Huebschman, Michael; Liu, Huaying; Sokolov, Konstantin et al. (30 de octubre de 2012). «Immunomagnetic nanoscreening of circulating tumor cells with a motion controlled microfluidic system». Biomedical Microdevices 15 (4): 673-681. ISSN 1387-2176. PMC 3584207. PMID 23109037. doi:10.1007/s10544-012-9718-8. 
  53. ↑ Hoshino, Kazunori; Chen, Peng; Huang, Yu-Yen; Zhang, Xiaojing (15 de mayo de 2012). «Computational Analysis of Microfluidic Immunomagnetic Rare Cell Separation from a Particulate Blood Flow». Analytical Chemistry 84 (10): 4292-4299. ISSN 0003-2700. PMC 3359653. PMID 22510236. doi:10.1021/ac2032386. 
  54. ↑ Chen, Peng; Huang, Yu-Yen; Hoshino, Kazunori; Zhang, John X.J. (4 de marzo de 2015). «Microscale Magnetic Field Modulation for Enhanced Capture and Distribution of Rare Circulating Tumor Cells». Scientific Reports 5: 8745. Bibcode:2015NatSR...5E8745C. ISSN 2045-2322. PMC 4348664. PMID 25735563. doi:10.1038/srep08745. 
  55. ↑ Huang, Yu-Yen; Chen, Peng; Wu, Chun-Hsien; Hoshino, Kazunori; Sokolov, Konstantin; Lane, Nancy; Liu, Huaying; Huebschman, Michael et al. (5 de noviembre de 2015). «Screening and Molecular Analysis of Single Circulating Tumor Cells Using Micromagnet Array». Scientific Reports 5: 16047. Bibcode:2015NatSR...516047H. ISSN 2045-2322. PMC 4633592. PMID 26538094. doi:10.1038/srep16047. 
  56. ↑ Chen, Peng; Huang, Yu-Yen; Bhave, Gauri; Hoshino, Kazunori; Zhang, Xiaojing (20 de agosto de 2015). «Inkjet-Print Micromagnet Array on Glass Slides for Immunomagnetic Enrichment of Circulating Tumor Cells». Annals of Biomedical Engineering 44 (5): 1710-1720. ISSN 0090-6964. PMC 4761332. PMID 26289942. doi:10.1007/s10439-015-1427-z. 
  57. ↑ Wang, Huiqiang; Chen, Nanhai G.; Minev, Boris R.; Zimmermann, Martina; Aguilar, Richard J.; Zhang, Qian; Sturm, Julia B.; Fend, Falko; Yu, Yong A.; Cappello, Joseph; Lauer, Ulrich M.; Szalay, Aladar A. (Septiembre 2013). «Optical Detection and Virotherapy of Live Metastatic Tumor Cells in Body Fluids with Vaccinia Strains». PLOS ONE 8 (9): e71105. Bibcode:2013PLoSO...871105W. PMC 3760980. PMID 24019862. doi:10.1371/journal.pone.0071105. 
  58. ↑ Agerbæk, Mette Ø.; Bang-Christensen, Sara R.; Yang, Ming-Hsin; Clausen, Thomas M.; Pereira, Marina A.; Sharma, Shreya; Ditlev, Sisse B.; Nielsen, Morten A.; Choudhary, Swati; Gustavsson, Tobias; Sorensen, Poul H.; Meyer, Tim; Propper, David; Shamash, Jonathan; Theander, Thor G.; Aicher, Alexandra; Daugaard, Mads; Heeschen, Christopher; Salanti, Ali (16 de agosto de 2018). «The VAR2CSA malaria protein efficiently retrieves circulating tumor cells in an EpCAM-independent manner». Nature Communications 9 (1): 3279. Bibcode:2018NatCo...9.3279A. PMC 6095877. PMID 30115931. doi:10.1038/s41467-018-05793-2. 
  59. ↑ GILUPI. «GILUPI - CellCollector in vivo CTC isolation». www.gilupi. de. 
  60. ↑ Saucedo-Zeni Nadia (2012). «A novel method for the in vivo isolation of circulating tumor cells from peripheral blood of cancer patients using a functionalized and structured medical wire». International Journal of Oncology 41 (4): 1241-1250. PMC 3583719. PMID 22825490. doi:10.3892/ijo.2012.1557. 
  61. ↑ Luecke, Klaus, et al. "The GILUPI CellCollector as an in vivo tool for circulating tumor cell enumeration and molecular characterization in lung cancer patients". Actas de la reunión anual de la ASCO. Vol. 33. No. 15_suppl. 2015. http://hwmaint.meeting.ascopubs.org/cgi/content/abstract/33/15_suppl/e22035 (enlace roto disponible en este archivo).
  62. ↑ Scheumann N (2015). «50P * Enumeration and Molecular Characterization of Circulating Tumor Cells in Lung Cancer Patients Using the Gilupi Cellcollector , an Effective in Vivo Device for Capturing CTCS». Annals of Oncology 26: i14. doi:10.1093/annonc/mdv045.14. 
  63. ↑ «An Introduction to the CellSearch». Archivado desde el original el 23 de enero de 2014. 
  64. ↑ Sánchez-Lorencio, M.I.; Ramirez, P.; Saenz, L.; Martínez Sánchez, M.V.; De La Orden, V.; Mediero-Valeros, B.; Veganzones-De-Castro, S.; Baroja-Mazo, A.; Revilla Nuin, B.; González, M.R.; Cascales-Campos, P.A.; Noguera-Velasco, J.A.; Minguela, A.; Díaz-Rubio, E.; Pons, J.A.; Parrilla, P. (November 2015). «Comparison of Two Types of Liquid Biopsies in Patients With Hepatocellular Carcinoma Awaiting Orthotopic Liver Transplantation». Transplantation Proceedings 47 (9): 2639-2642. PMID 26680058. doi:10.1016/j.transproceed.2015.10.003. 
  65. ↑ Bethel, Kelly; Luttgen2, Madelyn; Damani, Samir; Kolatkar2, Anand; Lamy, Rachelle; Sabouri- Ghomi, Mohsen; Topol, Sarah; Topol2, Eric et al. (9 Jan 2014). «Fluid phase biopsy for detection and characterization of circulating endothelial cells in myocardial infarction». Physical Biology 11 (1): 016002. Bibcode:.11a6002B 2014PhBio. .11a6002B. PMC 4143170. PMID 24406475. doi:10.1088/1478-3975/11/1/016002. 
  66. ↑ Pachmann, Katharina (5 de abril de 2015). «Current and potential use of MAINTRAC method for cancer diagnosis and prediction of metastasis». Expert Review of Molecular Diagnostics 15 (5): 597-605. PMID 25843106. S2CID 34030968. doi:10.1586/14737159.2015.1032260. 
  67. ↑ Pachmann K.; Camara O.; Kavallaris A.; Schneider U.; Schünemann S.; Höffken K. (2005). «Quantification of the response of circulating epithelial cells to neodadjuvant treatment for breast cancer: a new tool for therapy monitoring». Breast Cancer Res. 7 (6): R975-979. PMC 1410761. PMID 16280045. doi:10.1186/bcr1328. 
  68. ↑ Lobodasch, Kurt; Fröhlich, Frank; Rengsberger, Matthias; Schubert, Rene; Dengler, Robert; Pachmann, Ulrich; Pachmann, Katharina (April 2007). «Quantification of circulating tumour cells for the monitoring of adjuvant therapy in breast cancer: An increase in cell number at completion of therapy is a predictor of early relapse». The Breast 16 (2): 211-218. ISSN 0960-9776. PMID 17291754. doi:10.1016/j.breast.2006.12.005. 
  69. ↑ Camara O.; Rengsberger M.; Egbe A.; Koch A.; Gajda M.; Hammer U.; Jorke C.; Rabenstein C.; Untch M.; Pachmann K. (2007). «The relevance of circulating epithelial tumor cells (CETC) for therapy monitoring during neoadjuvant (primary systemic) chemotherapy in breast cancer». Ann. Oncol. 18 (9): 1484-1492. PMID 17761704. doi:10.1093/annonc/mdm206. 
  70. ↑ Camara O.; Rengsberger M.; Egbe A.; Koch A.; Gajda M.; Hammer U.; Jorke C.; Rabenstein C.; Untch M.; Pachmann K. (2007). Ann. Oncol. 18 (9): 1484-1492. PMID 17761704. doi:10.1093/annonc/mdm206. 
  71. ↑ Pachmann K.; Camara O.; Kohlhase A.; Rabenstein C.; Kroll T.; Runnebaum I.B.; Hoeffken K. (2010). «Assessing the efficacy of targeted therapy using circulating epithelial tumor cells (CETC): the example of SERM therapy monitoring as a unique tool to individualize therapy». J. Cancer Res. Clin. Oncol. 137 (5): 821-828. PMC 3074080. PMID 20694797. doi:10.1007/s00432-010-0942-4. 
  72. ↑ Pachmann K.; Camara O.; Kroll T.; Gajda M.; Gellner A.K.; Wotschadlo J.; Runnebaum I.B. (2011). «Efficacy control of therapy using circulating epithelial tumor cells (CETC) as "Liquid Biopsy": trastuzumab in HER2/neu-positive breast carcinoma». J. Cancer Res. Clin. Oncol. 137 (9): 1317-1327. PMC 3155034. PMID 21739182. doi:10.1007/s00432-011-1000-6. 
  73. ↑ Hekimian K.; Meisezahl S.; Trompelt K.; Rabenstein C.; Pachmann K. (2012). «Epithelial Cell Dissemination and Readhesion: Analysis of Factors Contributing to Metastasis Formation in Breast Cancer». ISRN Oncol 2012: 1-8. PMC 3317055. PMID 22530147. doi:10.5402/2012/601810. 
  74. ↑ Rolle A.; Günzel R.; Pachmann U.; Willen B.; Höffken K.; Pachmann K. (2005). «Increase in number of circulating disseminated epithelial cells after surgery for non-small cell lung cancer monitored by MAINTRAC is a predictor for relapse: A preliminary report». World J. Surg. Oncol. 3 (1): 18. PMC 1087511. PMID 15801980. doi:10.1186/1477-7819-3-18. 
  75. ↑ Camara Oumar; Kavallaris Andreas; Nöschel Helmut; Rengsberger Matthias; Jörke Cornelia; Pachmann Katharina (2006). «Seeding of Epithelial Cells into Circulation During Surgery for Breast Cancer: The Fate of Malignant and Benign Mobilized Cells». World Journal of Surgical Oncology 4: 67. PMC 1599731. PMID 17002789. doi:10.1186/1477-7819-4-67. 
  76. ↑ Desitter I. (2011). «A New Device for Rapid Isolation by Size and Characterization of Rare Circulating Tumor Cells». Anticancer Research 31 (2): 427-442. PMID 21378321. 
  77. ↑ Miller, M. Craig; Robinson, Peggy S.; Wagner, Christopher; O'Shannessy, Daniel J. (14 de agosto de 2018). «The Parsortix Cell Separation System—A versatile liquid biopsy platform». Cytometry Part A 93 (12): 1234-1239. PMC 6586069. PMID 30107082. doi:10.1002/cyto.a.23571. 
  78. ↑ Tkaczuk KH, Goloubeva O, Tait NS, Feldman F, Tan M, Lum ZP, Lesko SA, Van Echo DA, Ts'o PO (2008). «The significance of circulating epithelial cells in Breast Cancer patients by a novel negative selection method». Breast Cancer Res. Treat. 111 (2): 355-64. PMID 18064568. S2CID 25370612. doi:10.1007/s10549-007-9771-9. 
  79. ↑ Wang ZP, Eisenberger MA, Carducci MA, Partin AW, Scher HI, Ts'o PO (2000). «Identification and characterization of circulating prostate carcinoma cells». Cancer 88 (12): 2787-95. PMID 10870062. doi:10.1002/1097-0142(20000615)88:12<2787::aid-cncr18>3.0.co;2-2. 
  80. ↑ Polascik TJ, Wang ZP, Shue M, Di S, Gurganus RT, Hortopan SC, Ts'o PO, Partin AW (1999). «Influence of sextant prostate needle biopsy or surgery on the detection and harvest of intact circulating prostate cancer cells». J. Urol. 162 (3 Pt 1): 749-52. PMID 10458358. doi:10.1097/00005392-199909010-00034. 
  81. ↑ Ali A, Furusato B, Ts'o PO, Lum ZP, Elsamanoudi S, Mohamed A, Srivastava S, Moul JW, Brassell SA, Sesterhenn IA, McLeod DG (2010). «Assessment of circulating tumor cells (CTCs) in prostate cancer patients with low-volume tumors». Pathol. Int. 60 (10): 667-72. PMID 20846264. S2CID 205478411. doi:10.1111/j.1440-1827.2010.02584.x. 
  82. ↑ Hodgkinson, Cassandra L; Morrow, Christopher J; Li, Yaoyong; Metcalf, Robert L; Rothwell, Dominic G; Trapani, Francesca; Polanski, Radoslaw; Burt, Deborah J; Simpson, Kathryn L; Morris, Karen; Pepper, Stuart D; Nonaka, Daisuke; Greystoke, Alastair; Kelly, Paul; Bola, Becky; Krebs, Matthew G; Antonello, Jenny; Ayub, Mahmood; Faulkner, Suzanne; Priest, Lynsey; Carter, Louise; Tate, Catriona; Miller, Crispin J; Blackhall, Fiona; Brady, Ged; Dive, Caroline (1 de junio de 2014). «Tumorigenicity and genetic profiling of circulating tumor cells in small-cell lung cancer». Nature Medicine 20 (8): 897-903. PMID 24880617. S2CID 205393324. doi:10.1038/nm.3600. 
  83. ↑ Ozkumur E, Shah AM, Ciciliano JC, Emmink BL, Miyamoto DT, Brachtel E, Yu M, Chen PI, Morgan B, Trautwein J, Kimura A, Sengupta S, Stott SL, Karabacak NM, Barber TA, Walsh JR, Smith K, Spuhler PS, Sullivan JP, Lee RJ, Ting DT, Luo X, Shaw AT, Bardia A, Sequist LV, Louis DN, Maheswaran S, Kapur R, Haber DA, Toner M (2013). «Inertial focusing for tumor antigen-dependent and -independent sorting of rare circulating tumor cells». Science Translational Medicine 5 (179): 179. PMC 3760275. PMID 23552373. doi:10.1126/scitranslmed.3005616. 
  84. ↑ Meng S, Tripathy D, Shete S, Ashfaq R, Haley B, Perkins S, Beitsch P, Khan A, Euhus D, Osborne C, Frenkel E, Hoover S, Leitch M, Clifford E, Vitetta E, Morrison L, Herlyn D, Terstappen LW, Fleming T, Fehm T, Tucker T, Lane N, Wang J, Uhr J (2004). «HER-2 gene amplification can be acquired as breast cancer progresses». Proc. Acad. Sci. U.S.A. 101 (25): 9393-8. Bibcode:2004PNAS..101.9393M. PMC 438987. PMID 15194824. doi:10.1073/pnas.0402993101. 
  85. ↑ Hayes DF, Walker TM, Singh B (2002). «Monitoring Expression of HER-2 on Circulating Epithelial Cells in Patients with advanced Breast Cancer». Int J Oncol 21 (5): 1111-8. PMID 12370762. doi:10.3892/ijo.21.5.1111. 
  86. ↑ O'Hara SM, Moreno JG, Zweitzig DR (2004). «Multigene Reverse Transcription-PCR Profiling of Circulating Tumor Cells in Hormone-Refractory Prostate Cancer». Clin Chem 50 (5): 826-835. PMID 14988224. doi:10.1373/clinchem.2003.028563. 
  87. ↑ de Bono JS, Attard G, Adjei A (2007). «Potential Applications for Circulating Tumor Cells expressing the Insulin Growth Factor-I Receptor». Clin Cancer Res 13 (12): 3611-6. PMID 17575225. doi:10.1158/1078-0432.CCR-07-0268. 
  88. ↑ Karp DD, Pollak MN, Cohen RB (2009). «Pharmacokinetics and Pharmacodynamics of the IGF-IR Inhibitor Figitumumab (CP-751,871) in Combination with Paclitaxel and Carboplatin». Journal of Thoracic Oncology 4 (11): 1397-1403. PMC 2941876. PMID 19745765. doi:10.1097/JTO.0b013e3181ba2f1d. 
  89. ↑ Klotz, Remi; Thomas, Amal; Teng, Teng; Han, Sung Min; Iriondo, Oihana; Li, Lin; Restrepo- Vassalli, Sara; Wang, Alan; Izadian, Negeen; MacKay, Matthew; Moon, Byoung-San (2019-01- 01). «Circulating tumor cells exhibit metastatic tropism and reveal brain metastasis drivers». Cancer Discovery 10 (1): CD-19-0384. ISSN 2159-8274. PMC 6954305. PMID 31601552. doi:10.1158/2159-8290.CD-19-0384. 
  90. ↑ AGJ Tibbe; MC Miller; LWMM Terstappen (2007). «Statistical Considerations for Enumeration of Circulating Tumor Cells». Cytometry Part A. 71A (3): 132-142. PMID 17200956. S2CID 6648226. doi:10.1002/cyto.a.20369. 
  91. ↑ F. A. W. Coumans; C. J. M. Doggen; G. Attard (2010). «All circulating EpCAM1CK1CD452 objects predict overall survival in castration-resistant prostate cancer». Annals of Oncology 21 (9): 1851-7. PMID 20147742. doi:10.1093/annonc/mdq030. 
  92. ↑ Ashworth, T. R (1869). «A case of cancer in which cells similar to those in the tumours were seen in the blood after death». Australian Medical Journal 14: 146-7. 
  93. ↑ Racila, E.; Euhus, D.; Weiss, A. J.; Rao, C.; McConnell, J.; Terstappen, L. W. M. M.; Uhr, J. W. (1998). «Detection and characterization of carcinoma cells in the blood». Proceedings of the National Academy of Sciences 95 (8): 4589-4594. Bibcode:1998PNAS...95.4589R. ISSN 0027-8424. PMC 22534. PMID 9539782. doi:10.1073/pnas.95.8.4589. 
  94. ↑ Paul Liberti (22 de noviembre de 2013). archive.org/web/20170926095809/http://www.biomagneticsolutions.com/the-tools-that-fueled-the-new-world-of-circulating-tumor-cells-by-paul-a-liberti-biomagnetic-solutions/ «The tools that fueled the new world of Circulating Tumor Cells by Paul A. Liberti – BioMagnetic Solutions». biomargneticsolutions.com. Archivado desde com/the-tools-that-fueled-the-new-world-of-circulating-tumor-cells-by-paul-a-liberti-biomagnetic-solutions/ el original el September 26, 2017. Consultado el 25 de septiembre de 2017. 
  95. ↑ Fehm T, Sagalowsky A, Clifford E, Beitsch P, Saboorian H, Euhus D, Meng S, Morrison L, Tucker T, Lane N, Ghadimi BM, Heselmeyer-Haddad K, Ried T, Rao C, Uhr J (Jul 2002). «Cytogenetic evidence that circulating epithelial cells in patients with carcinoma are malignant». Clinical Cancer Research 8 (7): 2073-84. PMID 12114406. 
  96. ↑ Fidler IJ (2003). «Timeline: The pathogenesis of cancer metastasis: the 'seed and soil' hypothesis revisited». Nature Reviews Cancer 3 (6): 453-8. PMID 12778135. S2CID 9195161. doi:10.1038/nrc1098. 
  97. ↑ asco.org/content/124394-142 «Meeting Library - Meeting Library». meetinglibrary.asco.org. 
  98. ↑ Design, ISITE. «OASIS». www.abstractsonline.com. 

Enlaces externos