Michaelisova konstanta alebo Michaelisova koncentrace je základnou konštantou používanou pri opise kinetiky enzýmovej reakcie. Pomenovaná je podľa nemeckéhobiochemikaLeonora Michaelisa. Označuje sa KM.
Michaelisova konštanta je definovaná ako taká koncentrácia substrátu, pri ktorej rýchlosť enzýmovej reakcie dosahuje práve polovicu maximálnej rýchlosti:
Je v podstate mierou afinity medzi enzýmom a substrátom a je disociačnou konštantou pre komplex enzým–substrát (ES):
E + S ↔ ES
Hodnota konštanty je v daných podmienkach (pH, teplota, a pod.) typická pre každú dvojicu enzým – substrát. Vypovedá o kinetických vlastnostiach daného enzýmu:
nízka KM naznačuje, že enzým si vyžaduje len nízku koncentráciu substrátu na to, aby sa nasýtil a aby reakcia prebiehala maximálnou rýchlosťou a naopak,
o substrátoch s nízkou hodnotou KM sa predpokladá, že sú prirodzenými substrátmi daného enzýmu, aj keď to nie je všeobecne platné.