Divizia B 2000-2001 a fost a 61-a ediție a Diviziei B, al doilea eșalon fotbalistic al României.
Echipele de pe primul loc din fiecare serie au promovat direct în Divizia A la finalul sezonului, cele de pe locul secund au jucat un baraj de promovare, în timp ce șase echipe din fiecare serie au retrogradat în Divizia C.