Den andra hertugen, Cosimo de' Medici, etablerte en sterk florentinsk flåte og ekspanderte staten ved et innkjøp av øya Elba, og erobringen av republikken Siena. I år 1569 opphøyde pave Pius V så Cosimo til hertug i storhertugdømmet Toscana. Dermed ble også hertugdømmet Firenze innforlivet i storhertugdømmet Huset Medici styrte Toscana frem til 1737.
Litteratur
Strathern, Paul: The Medici: Godfathers of the Renaissance, Vintage books, London, 2003, ISBN 978-0-09-952297-3
Hale, J.R.: Florence and the Medici, Orion books, London, 1977, ISBN 1-84212-456-0
Frieda, Leonie: Catherine de' Medici, Orion books, London, 2005, ISBN 0-7538-2039-0