Ashcroft maakte in 1933 haar film- en acteerdebuut als Olalla Quintana in The Wandering Jew, de eerste van 16 filmrollen, 25 inclusief die in televisiefilms. Daarnaast speelde Ashcroft in verschillende televisieseries, voornamelijk rollen van historische, adellijke personages. Meer nog dan voor de camera acteerde ze in het theater.
Ashcroft trouwde drie keer. Haar eerste huwelijk was met Rupert Charles Hart-Davis en duurde van 1929 tot en met 1933. Ze hertrouwde een jaar na de scheiding met Theodor Komisarjevsky, maar ook dit hield geen stand. Haar derde echtgenoot Jeremy Hutchinson was van 1940 tot en met 1965 degene met wie Ashcroft het langst samenbleef. Met hem kreeg ze nog twee kinderen.
Op 83-jarige leeftijd overleed Ashcroft aan de gevolgen van een beroerte. Ze werd begraven op het kerkhof van de Westminster Abbey.