De African Cup of Nations 1965 was de vijfde editie van de Afrika Cup, het kampioenschap voor nationale voetbalelftallen. Het toernooi vond plaats van 12 tot en met 21 november. Er werd gespeeld in de steden Tunis, Sousse, Sfax en Bizerte in Tunesië. Tunesië (gastland) en Ghana (titelverdediger) waren automatisch geplaatst voor de eindronde. Ghana won voor de tweede opeenvolgende keer het kampioenschap.
Nadat Egypte van deelname afzag (Egypte onderhield geen diplomatieke betrekkingen met Tunesië) en Soedan de uitnodiging voor deelname niet aannam, accepteerde Congo-Kinshasa vervolgens de uitnodiging wel.