薄層クロマトグラフィー

黒インクをTLC展開した場合

薄層クロマトグラフィー（はくそうクロマトグラフィー、英: thin-layer chromatography、略称: TLC）はガラスの板の上にシリカゲル、アルミナ、ポリアミド樹脂などを薄く張ったもので、主に、反応の進行状況を迅速に確認したり、カラムをする際の分離条件を検討したり分離を確認したりして、物質の定性を行う際に用いられる。

担体のシリカゲルはカラムクロマトグラフィーと同じであるが、粒子の細かいものが使われているので分離能が高い。通常は順相のシリカゲル担体を用いるが、逆相シリカゲル担体や化学修飾担体（アミンや光学活性体で修飾した担体）のTLCも販売されている。

スポットの移動距離を溶媒の移動距離で割ったものをRf値（retention factor value、Rf value[1]）と呼ぶ。Rf値は溶離液組成、温度、担体、チャンバーの溶媒蒸気の飽和度、スポット量を管理すれば再現性があるので、サンプル同定にも使用できる。

カラムクロマトグラフィーとTLCとは両者ともRf値の順番で化合物が流出することがほとんどであるが、まれにカラムとTLCとで溶離順が一致しないことがあるので注意が必要である（大抵は、Rf値が0.5以上の条件で溶離したり、無理に流速を上げたり、またはサンプルをオーバーロードしたりといった、クロマトグラフィーの原理を無視することで発生する）。

また、シリカゲルが厚く（1-2 mm厚）張られたものを用いて少量（100 mg程度まで）の混合物の分離に用いられることもあり、分取TLC（preparative TLC、PTLC）と呼ばれる。

展開溶媒

カラムクロマトグラフィー同様、試料に最適な展開溶媒を予測することは容易ではなく、通常溶媒極性の異なる有機溶媒を複数混合し最適なスポット分離をする溶媒組成を試行錯誤で探索することになる。

順相TLCではRf値と溶媒強度パラメーター（P）は正の相関関係があるのでそれを目安に混合溶媒を探索する。

溶媒 P
ヘキサン 0.0
ジイソプロピルエーテル 2.4
1-プロパノール 3.9
テトラヒドロフラン 4.2
酢酸エチル 4.3
2-プロパノール 4.3
クロロホルム 4.4
エチルメチルケトン 4.7
1,4-ジオキサン 4.8
エタノール 5.2
ピリジン 5.3
アセトン 5.4
酢酸 6.2
アセトニトリル 6.2
メタノール 6.6
水 9.0

なお、HPLC級溶媒以外では溶媒に安定剤が添加されていることに留意すること。たとえばクロロホルムだと0.3～1 ％のエタノールが安定剤として含まれている。

また、テーリングする場合は、目的物と同じ置換基を持つ物質を「ごく少量」展開溶媒に加えると、分離が良くなることがある。例として、アミノ基の場合はトリエチルアミンやピリジン、カルボン酸ではギ酸や酢酸、ヒドロキシ基ならメタノールなど。

展開方法

二次元展開

二次元展開TLC

二次元展開（にじげんてんかい）または二次元薄層クロマトグラフィー（にじげんはくそうクロマトグラフィー）は二度展開することにより複雑な混合試料を高度に分離する技法である。

初回の展開は方形のTLC板の角に直交する両辺から溶媒に浸すマージンを適宜あけた隅を原点とし試料を置く。

大別するとスポットの分離を改善するために単一の固定相で初回と次回の展開溶媒を変えて二次元展開する方法と、ストライプ状に二種類（たとえば順相と逆相）の固定相を持つTLC板を用いてそれぞれの固定相で二次元展開する方法がある。

展開溶媒を変える方法では、最初の展開は原点が下になるようにして通常の展開を行う。その結果、TLC板の肩に一直線上にスポットが展開する。TLC板を十分に乾燥させて初回の溶媒の影響を取り除いてから、初回の展開が原点となるように辺を下にして、展開溶媒を変えて次回の展開を行う方法である。

二種類の固定相を持つTLC板の二次元TLCは、一方の固定相は一方の辺から1/5～1/4の幅で塗布されているので、初回の展開はその固定相帯の長辺方向に試料を展開する。次いで初回で展開した固定相を原点として次回の展開を行う。

検出方法（TLC）

UV照射によるスポット検出
リンモリブデン酸を用いたスポット検出

市販のTLC担体はUVインジケーター（F254）が配合されているので、UVを照射すると仄かに蛍光を発する。芳香環などUVを吸収するサンプルはUVインジケーターの蛍光を阻害するので、TLCにUVを照射してスポット位置を確認するのが普通である。

UVを吸収しないスポットの検出方法として、

  • 希硫酸をスプレーして、ホットプレートで焼く（あぶり出しの原理）
  • リンモリブデン酸液をスプレーして、ホットプレートで焼く（強酸化剤であるリンモリブデン酸が還元されると濃緑色になる）
  • ヨウ素ビン中でヨウ素蒸気に曝す
  • ニンヒドリン液をスプレーして、ホットプレートで焼く（アミノ酸の呈色）
  • アニスアルデヒド液をスプレーして、ホットプレートで焼く

等がある。

→その他のTLC呈色指示薬については「指示薬の一覧 § TLC呈色指示薬」を参照

TLC製品提供元

参考文献

  1. ^ 岩波 生物学辞典 第四版より

関連項目

手法
複合手法
理論
主要な学術誌

Read other articles:

中国人民解放军陆军第十四集团军炮兵旅

陆军第十四集团军炮兵旅陆军旗存在時期1950年 - 2017年國家或地區 中国效忠於 中国 中国共产党部門 中国人民解放军陆军種類炮兵功能火力支援規模约90门火炮直屬南部战区陆军參與戰役1979年中越战争 中越边境冲突 老山战役 成都军区对越轮战 紀念日10月25日 陆军第十四集团军炮兵旅（英語：Artillery Brigade, 14th Army），是曾经中国人民解放军陆军第十四集团军下属�...

 

Congrès du Globe

Compte-rendu des congrès SFIO de 1905. Le congrès du Globe, appelé aussi congrès de l'unité ou premier congrès de Paris, est le congrès de fondation de la Section française de l'Internationale ouvrière (SFIO). Il a eu lieu salle du Globe, boulevard de Strasbourg (Paris), du 23 au 25 avril 1905[1]. Il s'agit du 1er congrès socialiste. Contexte Lors de ce congrès les divers courants socialistes français existants, le Parti socialiste français (regroupant les « indépendants&#...

 

Aire d'attraction d'Agde

Aire d'attraction d'Agde Localisation de l'aire d'attraction d'Agde dans le département de l'Hérault. Géographie Pays France Région Occitanie Département Hérault Caractéristiques Type Aire d'attraction d'une ville Code Insee 166 Catégorie Aires de 50 000 à moins de 200 000 habitants Nombre de communes 6 Population 55 370 hab. (2021) modifier  L'aire d'attraction d'Agde est un zonage d'étude défini par l'Insee pour caractériser l’influence de la com...

Aspergillus niger

Aspergillus niger Mikrograf dari A. niger yang ditumbuhkan pada medium Sabouraud agar dengan perbesaran 100x Klasifikasi ilmiah Domain: Eukaryota Kerajaan: Fungi Filum: Ascomycota Subfilum: Pezizomycotina Kelas: Eurotiomycetes Ordo: Eurotiales Famili: Trichocomaceae Genus: Aspergillus Spesies: A. niger Nama binomial Aspergillus nigervan Tieghem 1867 Aspergilus niger merupakan fungi dari filum ascomycetes yang berfilamen, mempunyai hifa berseptat, dan dapat ditemukan melimpah di alam. ...

 

NBC Sports California

This article needs additional citations for verification. Please help improve this article by adding citations to reliable sources. Unsourced material may be challenged and removed.Find sources: NBC Sports California – news · newspapers · books · scholar · JSTOR (April 2015) (Learn how and when to remove this message) Television channel NBC Sports CaliforniaCountryUnited StatesBroadcast areaSan Francisco Bay AreaSacramentoNorthern CaliforniaGreater Los...

 

Антитринитаризм

ХристианствоБиблия Ветхий Завет Новый Завет Евангелие Десять заповедей Нагорная проповедь Апокрифы Бог, Троица Бог Отец Иисус Христос Святой Дух История христианства Апостолы Хронология христианства Раннее христианство Гностическое христианство Вселенские соборы Н...

Juno (sonde spatiale)

Vous lisez un « bon article » labellisé en 2011. Pour les articles homonymes, voir Juno. JunoSonde spatiale Vue d'artiste de la sonde Juno, avec Jupiter en arrière-plan.Données générales Organisation NASA/JPL Constructeur Lockheed Martin Programme New Frontiers Domaine Étude de la planète Jupiter Type de mission Orbiteur Statut Opérationnel Lancement 5 août 2011 (UTC) Lanceur Atlas V 551 Insertion en orbite 5 juillet 2016 (UTC) Fin de mission Septembre 2025 Identifiant C...

 

إنقاذ ما يمكن إنقاذه (فيلم)

إنقاذ ما يمكن إنقاذهمعلومات عامةالصنف الفني دراماتاريخ الصدور 30 ديسمبر 1985 مدة العرض 120 دقيقةاللغة الأصلية العربيةالبلد  مصر الطاقمالمخرج سعيد مرزوق الكاتب سعيد مرزوقالبطولة محمود ياسينمديحة كاملميرفت أمينالتصوير محسن نصر التركيب فكري رستمصناعة سينمائيةالمنتج سيد ط�...

 

List of Donald Trump 2020 presidential campaign non-political endorsements

This is a list of notable individual and organizations who publicly indicated support for Donald Trump in the 2020 United States presidential election. Businesspeople Sheldon Adelson Herman Cain Mike Lindell Dana White Miriam Adelson, philanthropist, doctor and wife of Sheldon Adelson[1] Sheldon Adelson, founder and chairman of the Las Vegas Sands Corporation[1] Jeff Ballabon, media executive and lobbyist[2] Ronnie Barrett, gun manufacturer and CEO of Barrett Firearms...

Dick and Jane

Series of children's early reading books For the 1977 film, see Fun with Dick and Jane (1977 film). For the 2005 film remake, see Fun with Dick and Jane (2005 film). Fun With Dick and Jane Dick and Jane are the two main characters created by Zerna Sharp for a series of basal readers written by William S. Gray to teach children to read. The characters first appeared in the Elson-Gray Readers in 1930 and continued in a subsequent series of books through the final version in 1965. These readers ...

 

Geneva Bible

16th-century English translation of the Bible Geneva BibleGeneva Bible 1560 editionFull nameGeneva BibleOther namesBreeches BibleNT published1557Complete Biblepublished1560Derived fromTyndale BibleTextual basisTextus Receptus (New Testament)Masoretic Text and influence from Tyndale and Coverdale (Old Testament)PublisherSir Rowland Hill of SoultonReligious affiliationProtestant (Reformed)Genesis 1:1–3 In the beginning God created the heaven and the earth. And the earth was without forme...

 

La Renaissance

La Renaissance (Prancis)E Zingo (Sango)Lagu kebangsaan  Republik Afrika TengahPenulis lirikBarthélémy BogandaKomponisHerbert PepperPenggunaan1960 La Renaissance (Terlahir kembali) adalah lagu kebangsaan Republik Afrika Tengah. Lirik lagu ini diciptakan oleh Barthélémy Boganda. Adapun komposisi lagu ini disusun oleh Herbert Pepper. Lirik Ô Centrafrique, ô berceau des Bantous ! Reprends ton droit au respect, à la vie ! Longtemps soumis, longtemps brimé par tous, Mais de c...

The Taking of Christ (Caravaggio)

Painting by Caravaggio The Taking of ChristItalian: Cattura di Cristo nell' ortoArtistCaravaggioYearc. 1602Mediumoil on canvasDimensions133.5 cm × 169.5 cm (52.6 in × 66.7 in)LocationNational Gallery of Ireland On loan from the Society of Jesus, Leeson Street., Dublin The Taking of Christ (Italian: Presa di Cristo nell'orto or Cattura di Cristo) is a painting, of the arrest of Jesus, by the Italian Baroque master Michelangelo Merisi da Caravaggio. O...

 

Should We Kiss First?

Should We Kiss First?Poster promosiNama alternatifShall We Kiss First?Hangul키스 먼저 할까요 GenreRomansaMelodramaDitulis olehBae Yoo-miSutradaraSon Jeong-hyunPemeranKam Woo-sungKim Sun-aOh Ji-hoPark Si-yeonNegara asalKorea SelatanBahasa asliKoreaJmlh. episode40ProduksiProduser eksekutifLee Hun-heeKim Dong-joonPengaturan kameraKamera tunggalDurasi35 minutesRumah produksiS.M. C&C[1]DistributorSBSRilis asliJaringanSBS TVFormat gambar1080i (HDTV)Format audioDolby DigitalRilis...

 

Marginal likelihood

In Bayesian probability theory Part of a series onBayesian statistics Posterior = Likelihood × Prior ÷ Evidence Background Bayesian inference Bayesian probability Bayes' theorem Bernstein–von Mises theorem Coherence Cox's theorem Cromwell's rule Likelihood principle Principle of indifference Principle of maximum entropy Model building Conjugate prior Linear regression Empirical Bayes Hierarchical model Posterior approximation Markov chain Monte Carlo Laplace's approximation Integrated nes...

Richard Bruton

Irish politician (born 1953) For the actor, see Richard Burton. Richard BrutonTDBruton in 2013Teachta DálaIncumbentAssumed office February 2016ConstituencyDublin Bay NorthIn officeFebruary 1982 – February 2016ConstituencyDublin North-CentralChair of the Fine Gael parliamentary partyIn office23 July 2020 – September 2023LeaderLeo VaradkarPreceded byMartin HeydonSucceeded byAlan DillonMinister for Communications, Climate Action and EnvironmentIn office11 October 2018&...

 

James Chadwick

British physicist (1891–1974) For the bishop, see James Chadwick (bishop). For the American gynaecologist, see James Read Chadwick. SirJames ChadwickCH FRSChadwick c. 1945Born(1891-10-20)20 October 1891Bollington, Cheshire, United KingdomDied24 July 1974(1974-07-24) (aged 82)Cambridge, United KingdomEducation University of Manchester (BSc) Gonville and Caius College, Cambridge (MSc, PhD) Known for Discovery of the neutron MAUD Committee Report Manhattan Project Awards Fe...

 

福嶋一雄

この記事は検証可能な参考文献や出典が全く示されていないか、不十分です。 出典を追加して記事の信頼性向上にご協力ください。（このテンプレートの使い方）出典検索?: 福嶋一雄 – ニュース · 書籍 · スカラー · CiNii · J-STAGE · NDL · dlib.jp · ジャパンサーチ · TWL (2014年8月) 福嶋 一雄 1954年撮影基本情報国籍 日本出身地 静�...

Red Week (Italy)

You can help expand this article with text translated from the corresponding article in Italian. (June 2021) Click [show] for important translation instructions. Machine translation, like DeepL or Google Translate, is a useful starting point for translations, but translators must revise errors as necessary and confirm that the translation is accurate, rather than simply copy-pasting machine-translated text into the English Wikipedia. Do not translate text that appears unreliable or low-q...

 

Cultura di Golasecca

Cultura di GolaseccaCollocazione della Cultura di Golasecca (IX-IV secolo a.C.) a sud della Cultura di Hallstatt (XIII-VI secolo a.C.)PeriodoEtà del ferro DateIX-IV secolo a.C. La cultura di Golasecca (IX-IV secolo a.C.) è una cultura della prima età del ferro che si sviluppò nell'Italia settentrionale; essa prende il nome dalla località di Golasecca (VA), in Lombardia, presso il Ticino. Agli inizi del XIX secolo, l'abate Giovanni Battista Giani effettuò, nell'area del Monsorino, i prim...