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Située dans la province de Rome, région du Latium, Palestrina est à 450 m d'altitude. Sa superficie est de 47 km2 et avec 21 600 habitants, elle présente une densité de 458 hab./km2. Elle est à 15 km de Colloferro et à 33 km de Rome, en amont dans la vallée terminale du Tibre à sa sortie des Anti-Apennins, série de collines allongées du nord au sud, d'origine volcanique à l'est.
La cité latine de Praeneste, proche de Rome, compte parmi les principales cités du Latium à l'époque archaïque. Son sanctuaireoraculairede Fortuna Primigenia, dont on voit encore des vestiges imposants, compte parmi les principaux centres religieux du Latium. La ville demeure indépendante jusqu'à la guerre sociale (90-88 av. J.-C.), après laquelle elle est transformée en municipe.