Buněčná linie HEK 293

Mikroskopický snímek buněčné linie HEK 293

Buněčná line HEK 293 (z angl. Human embryonic kidney) je linie odvozená z lidských embryonálních ledvinových buněk. Tyto buňky jsou pro svůj charakteristický způsob množení hojně využívány k výzkumným účelům. Využívají se jk přípravě stabilně transfekovaných buněčných linií nebo k biotechnologické produkci proteinů a virů pro genové terapie[1][2].

Historie

Tato komerčně dostupná buněčná linie byla připravena v roce 1977 Frankem Grahamem vložením genu lidského adenoviru typu 5 (transfekcí) do ledvinové buňky lidského embrya ženského pohlaví.[3]. Způsob transformace objasnil v roce 1973 zakladatel původní buněčné linie Alex van der Eb, který stejnou metodu aplikoval v témže roce na krysí embryonální ledvinové buňky [4].

Vlastnosti

Ledvinové embryonální buňky se skládají z epitelových buněk[5]. Na základě svého původu pak mají odpovídající tvar. Buňky se liší ve své velikosti v závislosti na kultivačních podmínkách. Běžná je velikost od 11 do 15 μm [6]. Vložený adenovirový vektor navíc obsahuje promotorovou oblast CMV, která zvyšuje účinnost produkce kódovaných proteinů[7].

Výhody

Nevýhody

Varianty

Od buněčné linie byly odvozeny následující varianty:

  • HEK 293T
  • HEK 293S
  • HEK 293 F
  • HEK 293 FT
  • HEK 293 FTM
  • HEK 293SG
  • HEK 293SGGD
  • HEK 293H
  • HEK 293E
  • HEK 293MSR
  • HEK A[8]

HEK 293 T

Tato dceřiná linie byla odvozena na Stanfordu v laboratoři Michele Carlosové pomocí plasmidového vektrou, který nesl původ replikace SV40. HEK 293T je lidská buněčná linie, která exprimuje mutantní verzi velkého T antigenu SV40. Takto odvozená linie je schopná čtyřicetkrát vyšší experese proteinu a využívá se k získávání rekombinantních retrovirů[7].

HEK 293S

Transfekce byla provedena s cílem získat linii rostoucí v suspenzi[9].

Aplikace

Buněčná linie je hojně využívaná ve farmaceutickém průmyslu pro screeningové testy. V této oblasti se využívá možnosti transfekovat buňky pomocí plasmidů, které kódují cílové látky. Tranfekované buňky je pak možné pěstovat ve velkých objemech. Dalším odvětvým, kde je linie hojně využívána je biotechnologie, kde se jejich prostřednictvím produkuje množství rekombinantních proteinů a enzymů. Zároveň jsou využívany k vývoji biosenzorů. V toxikologii jsou jejich prostřednictvím studovány účinky chemických látek a toxinů na buněčné procesy nebo genovou expresi. V neposlední řadě slouží buňky HEK293 k produkci rekombinantních virů například pro genovou terapii. Mezi často produkované kmeny patří adenoviry a lentiviry[6].

Kultivace

Buňky typicky rostou v monovrstvě a adherují k povrchu kultivační nádoby. Muže dojít i k jejich adaptaci na růst v supenzi. Jako zdroj živin se využívá DMEM médium (90 %) s přídavkem FBS (10 %). Pasáž kultury je vhodná přibližně po 2 až 3 dnech. Při pasážování se využívá enzymatické disociace buněk pomocí trypsinu. Kultivační nádoby se skladují v inkubátoru při 37 °C, s 5 % CO2 a vyšší relativní vlhkostí [10].

Etické otázky

Původem buněk se ve své studii zabývá Alvin Wong, který z nepřímých důkazů utváří závěr, že buňky byly odebrány z cíleně potraceného plodu. Tento fakt etickým dilematem pro některé katolíky a ortodoxní křesťany, pro které se používání linie HEK 293 a odvozených produktů stává nepřijatelné[11].

Během pandemie onemocnění covid-19 patřilo použití této linie při vyvoji vakcíny AKA AZD1222 od společnosti Oxford-AstraZeneca k argumentům odpíračů očkování[12]. Tyto buňky jsou z finálního produktu odfiltrovány.[13] Finální produkt tedy obsahuje pouze šimpanzí adenovirus kódující SARS-CoV-2 Spike glykoprotein ChAdOx1-S, který byl v buňkách rekombinantně připraven[14].

Římskokatolická církev považuje použití buněk při vývoji vakcíny proti covidu-19 za přijatelné za předpokladu, že neexistivala vhodná alternativa[15].

Odkazy

Reference

  1. THOMAS, Philip; SMART, Trevor G. HEK293 cell line: A vehicle for the expression of recombinant proteins. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 2005-05-01, roč. 51, čís. Electrophysiological Methods in Neuropharmacology, s. 187–200. Dostupné online [cit. 2023-04-17]. ISSN 1056-8719. DOI 10.1016/j.vascn.2004.08.014. (anglicky) 
  2. Cellosaurus cell line HEK293 (CVCL_0045). www.cellosaurus.org [online]. [cit. 2023-04-23]. Dostupné online. (anglicky) 
  3. GRAHAM, F. L.; SMILEY, J.; RUSSELL, W. C. Characteristics of a Human Cell Line Transformed by DNA from Human Adenovirus Type 5. Journal of General Virology. Roč. 36, čís. 1, s. 59–72. Dostupné online [cit. 2023-04-17]. ISSN 1465-2099. DOI 10.1099/0022-1317-36-1-59. 
  4. GRAHAM, F. L.; VAN DER EB, A. J. Transformation of rat cells by DNA of human adenovirus 5. Virology. 1973-08-01, roč. 54, čís. 2, s. 536–539. Dostupné online [cit. 2023-04-17]. ISSN 0042-6822. DOI 10.1016/0042-6822(73)90163-3. (anglicky) 
  5. STEPANENKO, A. A.; DMITRENKO, V. V. HEK293 in cell biology and cancer research: phenotype, karyotype, tumorigenicity, and stress-induced genome-phenotype evolution. Gene. 2015-09-15, roč. 569, čís. 2, s. 182–190. Dostupné online [cit. 2023-05-18]. ISSN 0378-1119. DOI 10.1016/j.gene.2015.05.065. (anglicky) 
  6. a b c STEUBING, Jonathan. HEK293 Cells. CLS Cell Lines Service GmbH [online]. [cit. 2023-04-23]. Dostupné online. (anglicky) [nedostupný zdroj]
  7. a b What is the Difference Between HEK293 and HEK293t. Compare the Difference Between Similar Terms [online]. 2021-09-15 [cit. 2023-04-23]. Dostupné online. (anglicky) 
  8. YUAN, Jun; XU, Wayne W.; JIANG, Snake. The Scattered Twelve Tribes of HEK293. Biomedical and Pharmacology Journal. 2018-06-25, roč. 11, čís. 2, s. 621–623. Dostupné online [cit. 2023-04-17]. (anglicky) 
  9. LIN, Yao-Cheng; BOONE, Morgane; MEURIS, Leander. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. Nature Communications. 2014-09-03, roč. 5, čís. 1, s. 4767. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 2041-1723. DOI 10.1038/ncomms5767. (anglicky) 
  10. Synthego | Full Stack Genome Engineering. www.synthego.com [online]. [cit. 2023-04-17]. Dostupné online. (anglicky) 
  11. WONG, Alvin. The Ethics of HEK 293. The National Catholic Bioethics Quarterly. 2006-08-01, roč. 6, čís. 3, s. 473–495. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. DOI 10.5840/ncbq20066331. (anglicky) 
  12. Trump’s antibody treatment was tested using cells originally derived from an abortion. MIT Technology Review [online]. [cit. 2023-04-23]. Dostupné online. (anglicky) 
  13. There are no foetal cells in the AstraZeneca Covid-19 vaccine. Full Fact [online]. 2020-11-26 [cit. 2023-04-23]. Dostupné online. (anglicky) 
  14. The Oxford/AstraZeneca (ChAdOx1-S [recombinant] vaccine) COVID-19 vaccine: what you need to know. www.who.int [online]. [cit. 2023-05-18]. Dostupné online. (anglicky) 
  15. Nota della Congregazione per la Dottrina della Fede sulla moralità dell’uso di alcuni vaccini anti-Covid-19. press.vatican.va [online]. [cit. 2023-04-23]. Dostupné online. 

Externí odkazy

Read other articles:

American politician For other people with the same name, see David Hopkins (disambiguation). David W. HopkinsMember of the U.S. House of Representativesfrom Missouri's 4th districtIn officeFebruary 5, 1929 – March 3, 1933Preceded byCharles L. FaustSucceeded byNone (District dissolved) Personal detailsBorn(1897-10-31)October 31, 1897Troy, Kansas, U.S.DiedOctober 14, 1968(1968-10-14) (aged 70)St. Joseph, Missouri, U.S.Political partyRepublican David William Hopkins (...

 

إليمرا هايتس   الإحداثيات 42°07′38″N 76°49′27″W / 42.1272°N 76.8242°W / 42.1272; -76.8242   [1] تقسيم إداري  البلد الولايات المتحدة[2]  التقسيم الأعلى مقاطعة تشيمونغ  خصائص جغرافية  المساحة 2.969214 كيلومتر مربع2.969216 كيلومتر مربع (1 أبريل 2010)  ارتفاع 268 متر  عدد ...

 

American politician William Emil Hesscirca 1943Member of the U.S. House of Representativesfrom Ohio's 2nd districtIn officeMarch 4, 1929 – January 3, 1937Preceded byCharles Tatgenhorst Jr.Succeeded byHerbert S. BigelowIn officeJanuary 3, 1939 – January 3, 1949Preceded byHerbert S. BigelowSucceeded byEarl T. WagnerIn officeJanuary 3, 1951 – January 3, 1961Preceded byEarl T. WagnerSucceeded byDonald D. Clancy Personal detailsBorn(1898-02-13)February ...

USA PATRIOT ActOther short titlesUniting and Strengthening America by Providing Appropriate Tools Required to Intercept and Obstruct Terrorism Act of 2001Long titleAn Act to deter and punish terrorist acts in the United States and around the world, to enhance law enforcement investigatory tools, and for other purposes.NicknamesPatriot ActEnacted bythe 107th United States CongressEffectiveOctober 26, 2001CitationsPublic law107-56Statutes at Large115 Stat. 272 (2001)CodificationA...

 

Restaurant in New York, United StatesAndanadaRestaurant informationEstablished2012Closed2017Head chefManuel BerganzaFood typeSpanishCityNew York CityStateNew YorkCountryUnited States Location had a different restaurant in 2020 Andanada was a Spanish restaurant located at 141 West 69th Street (between Broadway and Columbus) on the Upper West Side in Manhattan, New York City. Opening in 2012 under chef Manuel Berganza, it earned one Michelin star in 2014, which it maintained until its reported ...

 

Artikel ini sebatang kara, artinya tidak ada artikel lain yang memiliki pranala balik ke halaman ini.Bantulah menambah pranala ke artikel ini dari artikel yang berhubungan atau coba peralatan pencari pranala.Tag ini diberikan pada Februari 2023. Bunga sakura mekar di Chidorigafuchi Chidorigafuchi (千鳥ヶ淵code: ja is deprecated ) adalah promenade sepanjang kira-kira 700 m di tepi parit Chidorigafuchi, barat laut Istana Kekaisaran Jepang di Chiyoda, Tokyo. Promenade ini berada di sisi Jala...

Questa voce o sezione sull'argomento società di pallacanestro non cita le fonti necessarie o quelle presenti sono insufficienti. Puoi migliorare questa voce aggiungendo citazioni da fonti attendibili secondo le linee guida sull'uso delle fonti. Detroit PistonsPallacanestro Segni distintivi Uniformi di gara Casa Trasferta Terza divisa Colori sociali Blu reale, rosso, grigio, blu marino, bianco[1][2]              ...

 

Wilayah Württemberg 1810–1945. Württemberg (/ˈvɜːrtəmbɜːrɡ/) adalah wilayah historis yang terletak di Jerman selatan. Wilayah ini merupakan bagian dari negara bagian Baden-Württemberg bersama-sama dengan kawasan historis Schwaben, Baden, dan Hohenzollern. Württemberg sebelumnya juga dieja Würtemberg dan Wirtemberg. Sejarah Awalnya kawasan ini merupakan bagian dari Kadipaten Schwaben. Sejarahnya terbagi menjadi beberapa periode: Grafschaft Württemberg (1083–1495) Kadipaten Wü...

 

Surface-to-air missile Sea Oryx Sea Oryx Missile LauncherTypeSurface-to-air missilePlace of originTaiwanService historyUsed byTaiwan Sea Oryx Missile Display at MND Hall in 2019 The Sea Oryx (Chinese: 海劍羚飛彈系統; pinyin: Hǎi jiàn líng fēidàn xìtǒng) is a lightweight, infrared homing short-range air defense system developed for the Republic of China (Taiwan) Navy. Based on the TC-1L surface-to-air missile, it is designed to defend against anti-ship miss...

Jujutsu KaisenGambar sampul manga Jujutsu Kaisen volume pertama, yang diterbitkan di Jepang oleh Shueisha呪術廻戦GenrePetualangan, fantasi gelap, supernatural[1][2] MangaTokyo Metropolitan Curse Technical SchoolPengarangGege AkutamiPenerbitShueishaPenerbit bahasa InggrisNA Viz MediaImprintJump ComicsMajalahJump GIGADemografiShōnenTerbit28 April 2017 – 28 Juli 2017Volume1 MangaPengarangGege AkutamiPenerbitShueishaPenerbit bahasa InggrisNA Viz MediaPenerbit bahasa Indones...

 

Lo stesso argomento in dettaglio: Campionato mondiale di Formula 1 1953.  Gran Premio di Gran Bretagna 1953 29º GP del Mondiale di Formula 1Gara 6 di 9 del Campionato 1953 Data 18 luglio 1953 Nome ufficiale VI RAC British Grand Prix Luogo Circuito di Silverstone Percorso 4,7105 km / 2,927 US mi Pista permanente Distanza 90 giri, 423,949 km/ 263,43 US mi Clima Piovoso Risultati Pole position Giro più veloce Alberto Ascari Alberto AscariFerrari José Froilán González Ferrari in 1'480 ...

 

В Википедии есть статьи о других людях с такой фамилией, см. Воробьёв; Воробьёв, Максим. Максим Никифорович Воробьёв А. Г. Горавский. Портрет М. Н. Воробьёва. 1854Кремовая бумага, итальянский и графитный карандаши, растушка, белила. 37,7 × 29 смТретьяковская галерея, Москва[1] ...

Nouaillé-Maupertuiscomune Nouaillé-Maupertuis – Veduta LocalizzazioneStato Francia Regione Nuova Aquitania Dipartimento Vienne ArrondissementPoitiers CantoneVivonne TerritorioCoordinate46°31′N 0°25′E / 46.516667°N 0.416667°E46.516667; 0.416667 (Nouaillé-Maupertuis)Coordinate: 46°31′N 0°25′E / 46.516667°N 0.416667°E46.516667; 0.416667 (Nouaillé-Maupertuis) Superficie22,08 km² Abitanti2 825[1] (2009) Dens...

 

此條目可能包含不适用或被曲解的引用资料,部分内容的准确性无法被证實。 (2023年1月5日)请协助校核其中的错误以改善这篇条目。详情请参见条目的讨论页。 各国相关 主題列表 索引 国内生产总值 石油储量 国防预算 武装部队(军事) 官方语言 人口統計 人口密度 生育率 出生率 死亡率 自杀率 谋杀率 失业率 储蓄率 识字率 出口额 进口额 煤产量 发电量 监禁率 死刑 国债 ...

 

1277 - MCCLXXVII(2030 A.U.C.)747 år sedan År1274 | 1275 | 127612771278 | 1279 | 1280 Årtionde1250-talet  | 1260-talet 1270-talet1280-talet | 1290-talet Århundrade1100-talet 1200-talet1300-talet Årtusende1000-talet Året Födda | AvlidnaBildanden | Upplösningar 1277 (MCCLXXVII) var ett normalår som började en fredag i den Julianska kalendern. Händelser November 25 november – Sedan Johannes XXI har avlidit den 20 maj väljs...

Truth and Tolerance Book coverPengarangKardinal Joseph RatzingerJudul asliGlaube – Wahrheit – Toleranz: Das Christentum und die WeltreligionenPenerbitIgnatius PressTanggal terbit2004Halaman280ISBNISBN 978-1-58617-035-6 Truth and Tolerance (Jerman: Glaube – Wahrheit – Toleranz: Das Christentum und die Weltreligionencode: de is deprecated , bahasa Indonesia: Kebenaran dan Toleransi) adalah sebuah buku yang ditulis oleh Kardinal Joseph Ratzinger (Paus Benediktus XVI). Buku ...

 

1998 United States Senate election in New York ← 1992 November 3, 1998 2004 →   Nominee Chuck Schumer Al D'Amato Party Democratic Republican Alliance Parties Independence Liberal Parties Conservative Right to Life Popular vote 2,551,065 2,058,988 Percentage 54.62% 44.08% County resultsSchumer:      40–50%      50–60%      60–70%      70–80%   &...

 

Greek judge, writer and the Prime Minister of Greece (January 1910 – October 1910) Stefanos DragoumisΣτέφανος ΔραγούμηςPrime Minister of GreeceIn office18 January 1910 – 6 October 1910 (o.s.MonarchGeorge IPreceded byDimitrios RallisSucceeded byEleftherios VenizelosMinister of FinanceIn office24 September 1915 – 27 March 1916MonarchConstantine I of GreecePreceded byEmmanouil RepoulisSucceeded byDimitrios Rallis Personal detailsBorn1842Athens, GreeceDied...

British rock band QueenQueen in 1975. From left to right: Roger Taylor, Freddie Mercury, Brian May, and John DeaconBackground informationOriginLondon, EnglandGenresRockDiscographyQueen discographyYears active1970–presentLabelsEMIParlophoneElektraCapitolHollywoodIslandVirgin EMISpinoffsQueen + Paul RodgersQueen + Adam LambertSpinoff ofSmileMembers Brian May Roger Taylor Past members Freddie Mercury John Deacon See also: Early members Websitequeenonline.com Queen are a British rock band forme...

 

Political party in Greece National Democratic Union Εθνική Δημοκρατική ΈνωσιςFounderPetros GaroufaliasFounded1974Dissolved1977IdeologyGreek nationalism Royalism National conservatismPolitical positionRight-wing to far-rightPolitics of GreecePolitical partiesElections National Democratic Union (Greek: Εθνική Δημοκρατική Ένωσις, ΕΔΕ) was a Greek political party. The party was founded in 1974 by Petros Garoufalias, a former member of the ...