十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳

红细胞膜的蛋白质根据其分子量通过SDS-PAGE分离

十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(英語:sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)又称 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳莱氏凝胶电泳,是膠體電泳的一種,常用於生物化學鑑識科學遺傳學分子生物學等領域的分析技術,此項技術的原理,是利用檢體中蛋白質分子量大小的不同,使其在電泳膠中分離。是最常用的蛋白質分析技術之一。[1]为莱氏(Ulrich K. Laemmli)所研发。

原理

Bio-Rad公司的SDS-PAGE装置

將蛋白質溶液與SDS(十二烷基硫酸鈉)混合,SDS為界面活性劑會破壞蛋白質的二級結構使其變性,並包覆變性蛋白質,使其帶有一致的負電荷(大約每兩個氨基酸一個SDS)和一致的形狀(長條形)。如果沒有SDS使其負電荷一致,可能會使有相近分子量的蛋白質,分布於不同的位置,此種電泳法為原態膠體電泳(Native-PAGE)。進行電泳時,分子量較小的較容易落下,相反的分子量較大的則卡在起點附近。雖然較大的電壓可以縮短實驗的時間,卻會得到較模糊的結果,因此實驗可能長達數個小時。

材料與功能

丙烯醯胺是聚丙烯醯胺凝膠的基本成份,丙烯醯胺透過橋架分子聚合。

使用直立電泳組合時,由上(負極)至下(正極)的主要組成分別為緩衝液(Tris-Glycine,pH 8.3)→樣本溶液(pH 6.8)→堆积层(Tris-HCl,pH 6.8)→分离层(Tris-HCl,pH 8.8)→緩衝液(Tris-Glycine,pH 8.3)。

樣本在堆疊層電泳的過程中,會被壓成一個薄層,再以相同的起始點,進入分離層。

堆积层原理

堆积层含有4-5%的丙烯酰胺,这样堆积层的孔径就相对较大和松散。这一层的目的是让样品在堆积层和分离层的界面浓缩到一个超薄的区域(1-100nm)。当施加电压时,由于蛋白质外包裹着SDS,便使蛋白向正极迁移,由于这层的pH是6.8,甘氨酸在这里呈两性离子状态存在,所以这一层的离子强度便很低,从而形成高电阻,最终形成 高电场力 ,从而使蛋白质的在堆集层的迁移速率高于分离层。另外由于这层的孔径大,所以对一般蛋白质的迁移速率不造成影响; 另外当蛋白质到达堆积层和分离层边界时,分离层孔径小,首先到达边界的蛋白质速率便减慢,而后来的蛋白质仍然保持高速率迁移,便使得蛋白质在边界处堆积浓缩。

製備化學藥劑

操作和顯影化學藥劑

相關條目

参考资料

  1. ^ Laemmli, U. K. Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacteriophage T4. Nature. 1970, 227 (5259): 680–685. ISSN 0028-0836. doi:10.1038/227680a0. 

Read other articles:

Air Algerie Flight 6289Ringkasan peristiwaTanggal6 Maret 2003RingkasanKecelakaan saat mengudaraLokasiTamanrasset, AljazairPenumpang97Awak6Cedera0Tewas102Selamat1Jenis pesawatBoeing 737-200OperatorAir AlgerieRegistrasi7T-VEZ Air Algerie Penerbangan 6289, merupakan sebuah penerbangan berjadwal dari maskapai Air Algerie dengan menggunakan pesawat Boeing 737-200 dengan rute Tamanghasset, Aljazair, menuju Aljir melalui Ghardaia. Pada tanggal 6 Maret 2003, pukul 15:45 waktu setempat, pesawat l...

 

Tesis adalah pernyataan atau teori yang didukung oleh argumen yang dikemukakan dalam karya tulis ilmiah; untuk mendapatkan gelar kesarjanaan pada perguruan tinggi. Tesis juga dapat berarti sebuah karya tulis ilmiah resmi akhir seorang mahasiswa. Tesis merupakan bukti kemampuan yang bersangkutan dalam penelitian dan pengembangan ilmu pada salah satu bidang keilmuan dalam ilmu pendidikan sesuai ilmu yang telah dipelajari. Karakteristik Berfokus pada kajian mengenai salah satu isu sentral yang t...

 

Granular whitish deposit of ice formed by freezing fog Hard rime on a tree Wind blown rime ice formed on the summit cross of the Fronalpstock Rime ice forms when supercooled water droplets freeze onto surfaces. In the atmosphere, there are three basic types of rime ice: Soft rime forms when supercooled water freezes under calm wind conditions. It is milky and crystalline, like sugar, and similar to hoar frost. Hard rime forms by rapid freezing of supercooled water under at least moderate wind...

Ceratopsidae Periode Kapur Akhir,~83–66 jtyl PreЄ Є O S D C P T J K Pg N Montase dari empat anggota Ceratopsidae. Searah jarum jam dari kiri atas: Titanoceratops, Styracosaurus, Utahceratops dan TriceratopsTaksonomiKerajaanAnimaliaFilumChordataKelasReptiliaOrdoOrnithischiaUpaordoCeratopsiaFamiliCeratopsidae Tata namaSinonim takson Agathaumidae Cope, 1891 Torosauridae Nopcsa, 1915 Subkelompok †Ceratops? †Dysganus †Centrosaurinae †Chasmosaurinae lbs Ceratopsidae (terkadang dise...

 

Civilization IV: Warlords Tipepaket ekspansi Versi pertama Amerika Serikat : 24 Juli 2006 Uni Eropa : 28 Juli 2006GenrePermainan strategi berbasis giliranBagian dariCivilization IV Karakteristik teknisPlatformmacOS dan Windows MesinGamebryoModepermainan video multipemain, Permainan video pemain tunggal, multiplayer online game dan co-op mode Formatcakram digital Format kode Daftar 30 Informasi pengembangPengembangFiraxis GamesPenyuntingTake-Two Interactive KomponisJeff Briggs P...

 

МифологияРитуально-мифологическийкомплекс Система ценностей Сакральное Миф Мономиф Теория основного мифа Ритуал Обряд Праздник Жречество Мифологическое сознание Магическое мышление Низшая мифология Модель мира Цикличность Сотворение мира Мировое яйцо Мифическое �...

Berikut ini merupakan daftar dari tokoh-tokoh yang dimakamkan di Pemakaman Montparnasse, Paris, Prancis: A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z Gallery Lihat pula Referensi Pranala luar A Henri Alekan (1909–2001), sinematografer Alexander Alekhine (1892–1946), juara dunia catur kelahiran Rusia Grace Alekhine (1876–1956), seniman dan master catur Michèle Arnaud (1919–1998), penyanyi Henry Aron (1842–1885), wartawan dan penulis esai politik Raymond Aron (1905–1983), f...

 

У этого термина существуют и другие значения, см. Тур. Запрос «Bos taurus primigenius» перенаправляется сюда; см. также другие значения. † Тур Скелет тура Научная классификация Домен:ЭукариотыЦарство:ЖивотныеПодцарство:ЭуметазоиБез ранга:Двусторонне-симметричныеБез ранга:В...

 

Державний комітет телебачення і радіомовлення України (Держкомтелерадіо) Приміщення комітетуЗагальна інформаціяКраїна  УкраїнаДата створення 2003Керівне відомство Кабінет Міністрів УкраїниРічний бюджет 1 964 898 500 ₴[1]Голова Олег НаливайкоПідвідомчі ор...

Radio station in Grundy Center, Iowa KCRRGrundy Center, IowaBroadcast areaWaterloo-Cedar FallsFrequency97.7 MHzBranding97.7 KCRRProgrammingFormatClassic rockAffiliationsCompass Media NetworksOwnershipOwnerTownsquare Media(Townsquare License, LLC)Sister stationsKKHQ-FM, KOEL, KOEL-FMHistoryFirst air date1983 (1983) (as KGCI)Former call signsKGCI (1983–1995)Call sign meaningClassic Rock RadioTechnical informationFacility ID25471ClassC3ERP16,000 wattsHAAT124 meters (407 ft)LinksWebca...

 

Combustible sedimentary rock composed primarily of carbon For other uses, see Coal (disambiguation). It has been suggested that this article should be split into multiple articles. (discuss) (May 2024) Part of a series onCoal Economic use Ammonia Anthracite Bituminous coal Charcoal Coal combustion products Coal-fired power station Coal gas Coal in Australia Canada Europe India Poland Russia South Africa Turkey Ukraine Coal mining in Chile in the UK in the USA Coal-mining region Coal power in ...

 

Fictional character, mother of Bruce Wayne (Batman) Comics character Martha WayneMartha Wayne in Detective Comics #853 (June 2009).Art by Andy Kubert.Publication informationPublisherDC ComicsFirst appearanceDetective Comics #33 (November 1939)Created byBill Finger (writer)Gardner Fox (writer)Bob Kane (artist)Jerry Robinson (artist)[1]In-story informationFull nameMartha KaneSupporting character ofThomas Wayne (husband)Bruce Wayne (son)Damian Wayne (grandson)Helena Wayne (granddaughter)...

Artikel ini tidak memiliki referensi atau sumber tepercaya sehingga isinya tidak bisa dipastikan. Tolong bantu perbaiki artikel ini dengan menambahkan referensi yang layak. Tulisan tanpa sumber dapat dipertanyakan dan dihapus sewaktu-waktu.Cari sumber: Radar Banjarmasin – berita · surat kabar · buku · cendekiawan · JSTOR Radar BanjarmasinPaling Paham Soal BanuaTipeSurat kabar harianPemilikPT Duta Banua BanjarDidirikan25 Januari 2001PusatBanjarbaruSitus...

 

Mikhail Grigoryevich Tskhakaya (4 Mei 1865 – 19 Maret 1950), juga dikenal sebagai Barsov, adalah seorang komunis asal Georgia. Barsov adalah seorang pemimpin senior dalam gerakan Bolshevik di Georgia, yang aktif dalam politik revolusioner sejak 1880. Ia lahir pada 1865 di Munisipalitas Martvili. Pada 1892, ia membantu pendirian Mesame Dasy (kelompok ketiga), partai sosialis Georgia yang pertama. Saat Partai Buruh Demokrat Sosial Rusia dibentuk, ia bergabung dengannya. Ia meny...

 

Category 1 Atlantic hurricane in 1956 Flossy redirects here. For the nickname, see Florence (given name). Hurricane Flossy Meteorological historyFormedSeptember 20, 1956ExtratropicalSeptember 25, 1956DissipatedOctober 3, 1956Category 1 hurricane1-minute sustained (SSHWS/NWS)Highest winds90 mph (150 km/h)Lowest pressure974 mbar (hPa); 28.76 inHgOverall effectsFatalities15Damage$24.9 million (1956 USD)Areas affectedYucatán Peninsula, United States Gulf Coast, East...

معركة الزميل جزء من الفتح الإسلامي لفارسحملات خالد بن الوليد موقع الزميل على الخارطة، حيث معارك خالد بن الوليد معلومات عامة التاريخ رمضان 12 هـ الموافق نوفمبر 633م الموقع العراق النتيجة انتصار جيش المسلمين المتحاربون الخلفاء الراشدين الساسانيونالعرب النصارى القادة خالد ب...

 

2013 video game 2013 video gameDr. LuigiDeveloper(s)ArikaNintendo SPDPublisher(s)NintendoDirector(s)Takao NakanoTomoko NakayamaDaiki SasakiProducer(s)Hitoshi YamagamiIchirou MiharaDesigner(s)Tatsuya UshirodaComposer(s)Masaru TajimaSeriesDr. MarioLuigiPlatform(s)Wii UReleaseNA: December 31, 2013WW: January 15, 2014Genre(s)PuzzleMode(s)Single-player, multiplayer Dr. Luigi[a] is a 2013 puzzle video game developed by Arika and Nintendo SPD, and published by Nintendo for the Wii U console...

 

Defunct American motor vehicle manufacturer Louis Chevrolet c. 1910 Frontenac Motors ad Frontenac race car before the 1921 Indianapolis 500. Driver Tommy Milton at the wheel, with Barney Oldfield and Louis Chevrolet. Frontenac Motor Corporation was a joint venture of Louis Chevrolet, Indy 500 winner Joseph Boyer Jr., Indianapolis car dealer William Small, and Zenith Carburetor president Victor Heftler. Per articles of Incorporation on file in the Michigan State Archives, it was founded in Det...

Former railway station in Wales Llwyngwern was a station on the Corris Railway in Wales, built to serve the hamlet of Pantperthog and the residents of Plas Llwyngwern, a house where a daughter of the 5th Marquess of Londonderry lived with her husband. Although the Plas was in Montgomeryshire, the station was across the Afon Dulas in Merionethshire. The station was built at Llwyngwern, rather than at Pantperthog, because there is a very tight bend and a steep gradient on the railway at Pantper...

 

سيدني لوميت (بالإنجليزية: Sidney Lumet)‏  معلومات شخصية الميلاد 25 يونيو 1924(1924-06-25)فيلادلفيا، بنسيلفانيا الوفاة 9 إبريل 2011 (86 عاما)مدينة نيويورك، نيويورك سبب الوفاة ورم لمفي مواطنة الولايات المتحدة  الزوجة جلوريا فاندربلت (28 أغسطس 1956–1963)ريتا غام (1949–1955)  الحياة العملية ال�...