Мастроені переїхав до Сполучених Штатів з Аргентини зі своєю сім'єю у віці чотирьох років, поселившись в місті Фенікс, штат Аризона. Футбольну кар'єру Мастроені розпочав у футбольній команді Університету штату Північна Кароліна. У 1998 році він був задрафтований під загальним тринадцятим номером командою «Маямі Ф'южн», за яку він згодом виступав чотири роки, аж до розформування команди.
У 2002 році в результаті драфту розподілу Мастроені опинився в клубі «Колорадо Рапідз», за який виступав до червня 2013 року, коли Пабло перейшов в «Лос-Анджелес Гелаксі». 10 грудня 2013 року оголосив про завершення кар'єри футболіста[1].
У збірній
У національній збірній Мастроені дебютував в червні 2001 року в матчі з Еквадором. Провів за збірну 65 матчів. Був у складі збірної США на двох чемпіонатах світу, 2002 і 2006 роках, а також став триразовим володарем Золотого кубка КОНКАКАФ
.
