Как правило, для фиксации мазка применяются 95% этанол. Реже применяется 100% метанол, 80% изопропанол или 80% пропанол.
Мазки фиксируются в течение 20-30 минут[4].
Классическое окрашивание по Папаниколау
Классическая процедура окраски по Папаниколау включает пять окрашиваний в трех растворах.
Первый раствор содержит гематоксилин, который окрашивает клеточные ядра.
Второй окрашивающий раствор (OG-6) содержит Оранжевый Ж в 95% этаноле с небольшим количеством фосфорновольфрамовой кислоты.
Сверхбыстрое окрашивание по Папаниколау - это альтернативный вариант процедуры окрашивания для препаратов тонкоигольной аспирационной пункционной биопсии. Процесс отличается регидратацией высушенного на воздухе мазка физраствором, использованием для фиксации 4 % формальдегида в 65 % этаноле, гематоксилин и коммерческий краситель Cyto-Stain[англ.]. Данная модификация окрашивания по Папаниколау позволяет производить окраску препарата за 90 секунд[5].
Результат
В результате окрашивания по Папаниколау клетки остаются прозрачными. Ядра клеток принимают цвет от синего до черного. Цитоплазма окрашивается в сине-зеленый цвет; кератин - в оранжевый.
Эозин Y окрашивает поверхностный плоский эпителий, ядрышки, реснички и эритроциты. Светло-зеленый SF желтоватый[англ.] придает голубое окрашивание цитоплазме призматических, парабазальных плоских и промежуточных плоских клеток. Поверхностные клетки окрашиваются от оранжевого до розового, а промежуточные и парабазальные клетки становятся бирюзово-зелеными или голубыми[6].