Марио Милани родился в семье Фортунато и Олинды Милани. Семья была очень обеспеченной: Фортунато был крупным бразильским промышленником и одним из пионеров консервного бизнеса в стране, а также основателем крупной корпорации Gessy Lever. Марио учился в приходской школе имени Франсиско Теллеса, а затем получил образование бухгалтера в школе профессора Луиса Розы[2]. Милани начал карьеру в клубе «Эстрела де Оуро» в возрасте 14 лет. Годом позже нападающий перешёл в «Минас-Жерайс», а в 1935 году в «Атлетико Комерсиал». В 1938 году Милани стал игроком «Сан-Паулу», куда ему помог попасть другой известный футболист, также выходец из Жундиаи, Ромеу Пелличчиари[2]. Там он провёл один сезон, сыграв в 37 матчах (15 побед, 4 ничьи и 18 поражений) и забил 20 голов[3]. В январе 1939 года Марио стал игроком «Флуминенсе». Там игрок также выступал два года, выиграв в 1940 году Лигу Кариока. Он провёл за клуб 45 матчей (24 победы, 10 ничьи и 11 поражений) и забил 34 гола. Последний матч за клуб Милани сыграл 8 декабря 1940 года против «Мадурейры»[4].
В начале 1941 года Милани перешёл в «Коринтианс», где дебютировал 4 мая в матче с «Португезой Сантистой» и где забил два гола (2:0)[5]. В первый же сезон нападающий помог команде выиграть титул чемпиона штата Сан-Паулу[1]. Годом позже футболист стал лучшим бомбардиром чемпионата штата с 24 забитыми голами. В 1943 году некоторые источники утверждают, что Марио забил 20 голов и стал лучшим бомбардиром первенства[3][6][7], однако другие отдают звание лучшего снайпера чемпионата Эркулесу с 19 забитыми голами[8]. Всего за «Коринтианс» Марио играл 8 сезонов, проведя по одним данным 129 матчей (86 побед, 19 ничьих и 24 поражения) и забил 100 голов[1], по другим — 127 матчей (85 побед, 18 ничьих и 24 поражения) и забил 98 голов[3].
В 1948 году Милани стал игроком «Жувентуса», а затем «Паулисты», где завершил игровую карьеру[2][9]. После этого он стал работать госслужащим, трудясь на должности финансового секретаря в Жундиаи, а также в Итупеве[10]. Последние годы жизни Милани страдал от болезни Альцгеймера[5]. Он умер в 2003 году.
Милани был женат. Супруга — Мария Рибейро, с которой он обручился в 1944 году[2], по другим данным — в 1943 году[5]. У них были дети, Олга Мария и Жозе Антонио[2]. В браке супруги прожили более 60 лет[10].