Hydrolazy (EC 3^[1]) – klasa enzymów katalizujących rozcięcie wiązań chemicznych w procesie hydrolizy. Do grupy tej należy wiele enzymów trawiennych. Cechą charakterystyczną hydrolaz jest fakt, że nie posiadają one koenzymów. Ich działanie można przedstawić ogólnie jako: AB + H₂O → A-H + B-OH

Do klasy hydrolaz należą:

• EC 3.1 esterazy
• EC 3.2 glukozydazy - rozcinające węglowodany
• EC 3.4 - proteazy - rozcinające białka (np. trypsyna - EC.3.4.21.4)
• nukleazy - rozcinające kwasy nukleinowe (np. rybonukleazy, DNazy)
• amylaza
• amyloglukozydaza
• inwertazy - rozcinające wiązanie β-glikozydowe sacharozy
• fosfatazy - katalizujące defosforylację estrów fosforanowych, np. nukleotydów
• lipazy - rozcinające tłuszcze

• Hydrolaza estru cholesterolowego

• Biochemia - Edward Bańkowski, Wydawnictwo Medyczne Urban&Partner Wrocław 2004, ISBN 83-89581-10-8