Landsdelsserien 1959–60 var det nest øverste nivået i norsk herrefotball denne sesongen. Divisjonen besto av 54 lag fordelt på sju avdelinger.
Opp- og nedrykk
Ett lag fra hver av Østland-distriktene rykket direkte opp til Hovedserien 1960–61, mens ett lag fra Sørland/Vestland og ett lag fra Møre/Trøndelag rykket opp etter kvalik.
Ett til to lag fra hver avdeling rykket ned til 3. divisjon 1960-61.