מבחן קואגולאז

מבחן קואגולאזאנגלית: Coagulase test) הוא אחד מהמבחנים הביוכימיים המקובלים במיקרוביולוגיה שמיועד לשם ביצוע הבחנה ראשונית בין סוגים ומינים שונים של חיידקים. במיקרוביולוגיה קלינית משתמשים במבחן זה, בדרך כלל, על מנת לבצע הבחנה של חיידקי Staphylococcus aureus מיתר החיידקים השייכים לסוג Staphylococcus. המבחן מתבסס על יכולתו (או אי-יכולתו) של מיקרואורגניזם להפוך פיברינוגן, באמצעות האנזים קואגולאז, לפיברין ובכך לגרום להקרשה של פלזמה הנראית לעין. את המבחן מבצעים בדרך כלל על גבי זכוכית נושאת של מיקרוסקופ, או בתוך מבחנה[1].

אנזים קואגולאז

תמונה זאת, שצולמה דרך מיקרוסקופ אלקטרונים חודר, חושפת צמד חיידקי Staphylococcus aureus המגנים על עצמם בפני מערכת החיסון של המאכסן על ידי יצירת מעטפת פיברינית סביבם

קואגולאז הוא אנזים מקבוצת הפרוטאזות, שמסונתז על ידי מספר מיקרואורגניזמים, שביכולתו להפוך את החלבון פיברינוגן לפיברין ולגרום בכך לקרישת הדם. בחלק מחיידקים בסוג Staphylococcus ניתן למצוא שני איזופורמים של האנזים: קואגולאז קשור (Bound coagulase, נקרא גם Clumping factor), וקואגולאז מופרש-חופשי(Free-secreted coagulase, נקרא גם Staphylocoagulase). לשני האיזופורמים אופן פעילות שונה ונוכחותם מהווה גורם אלימות מרכזי בחיידקים שמסנתזים אותם[1][2].

סוגי הקואגולאז ואופן פעולתם

להלן אופן פעולת הקואגולאז על שני האיזופורמים שלו בחיידקים מהסוג Staphylococcus:

  • קואגולאז קשור - קואגולאז קשור הוא חלק מקבוצת חלבונים אשר נקראים MSCRAMMs ‏(Microbial Surface Components Recognizing Adhesive Matrix Molecules), להם תפקיד מרכזי באדהזיה של חיידקים. חלבונים אלה מאפשרים לחיידקים להצמד אחד לשני ולרקמות תאים, דבר שמהווה שלב מקדים ביצירת ביופילם ובחיידקים פתוגניים להתחלת התחלואה. לקואגולאז זה זיקה גבוהה מאוד למולקולות פיברינוגן, דבר שמוביל ליצירת תצמידי חיידק-פיברינוגן ולאגרגציה תלוית פיברינוגן של חיידקים עם מרכיבי הדם, דוגמת טסיות[3].
  • קואגולאז חופשי-מופרש - מבחינה ביוכימית מגיב הקואגולאז החופשי בדם עם הצורה הבלתי פעילה של החלבון פרותרומבין ויוצר בכך קומפלקס שנקרא סטפילותרומבין (Staphylothrombin). יצור קומפלקס זה מאפשר את חיתוכו של פיברינוגן לפיברין, דבר שמוביל לקרישת הדם ולאגרגציה של טסיות[4].

בחיידקים מהמין Staphylococcus aureus פועלים שני האיזופורמים הללו בסינרגיה[5][6][7]:

  1. חיידקים אלה קושרים אליהם מולקולות של פיברינוגן באמצעות האיזופורם הקשור ויוצרים אגרגטים תלויי פיברינוגן עם טסיות.
  2. במקביל מופרשים האיזופורמים החופשיים שיוצרים תצמידי סטפילותרומבין.
  3. קומפלקסי סטפילותרומבין יוצרים מעטפת פיברינית סביב תאי החיידקים.
  4. יצירת מעטפת פיברינית סביב החיידקים בזרם הדם מגנה עליהם בפני פעילות מערכת החיסון של המאכסן, בכך שהיא מקשה על תהליך הפגוציטוזה ועל אופסוניזציה של נוגדנים.

בהמשך לנאמר חשוב לציין שקיימים זנים של Staphylococcus aureus שאינם מייצרים קואגולאז כלל[1].

אופן ביצוע המבחן

להלן שתי השיטות הנפוצות לביצוע מבחן קואגולאז על כל שלביהן[1][5]:

שיטת הזכוכית הנושאת

  1. באמצעות כלי מתאים (פיפטה, טפי וכדומה) יש למקם שתי טיפות סליין על גבי הזכוכית הנושאת. טיפה אחת לביצוע המבחן עצמו וטיפה שנייה לביצוע ביקורת שלילית.
  2. באמצעות מחט בקטריולוגית, או קיסם עץ סטרילי יש להרים מושבת חיידקים מבודדת, נקייה וטרייה מעל צלחת פטרי (24 שעות לאחר זריעה על מצע אגר) ולמרוח אותה בעדינות בתוך טיפת סליין שמיועדת לבדיקה עצמה עד ליצירת תערובת הומוגנית.
  3. באמצעות כלי מתאים (פיפטה, טפי וכדומה) יש למקם שתי טיפות פלזמה שמסופקות בערכה מסחרית (לרוב משתמשים בפלזמה של ארנבת בתוספת נוגד הקרישה EDTA), את האחת בתוך תמיסת הסליין שמעורבבת עם מושבת החיידקים ואת השנייה בתוך טיפת הסליין ללא החיידקים שמיועדת לביקורת שלילית.
  4. באמצעות מחט בקטריולוגית או קיסם עץ סטרילי יש לערבב בעדינות את שתי הטיפות.
  • אם כעבור 5-10 שניות ניתן להבחין בהיווצרות של אגלוטינציה, אזי המיקרואורגניזם שנבדק יקרא קואלגולאז-חיובי.
  • אם כעבור 5-10 שניות לא ניתן להבחין בהיווצרות של אגלוטינציה, אזי המיקרואורגניזם שנבדק יהיה חשוד לקואגולאז-שלילי. במצב זה יש צורך לבצע את מבחן הקואגולאז בשיטת המבחנה.

שיטה זאת מיועדת לבדוק את נוכחות האיזופורם הקשור של הקואגולאז.

שיטת המבחנה

קריש פיברין הנראה לעין מעיד על מבחן קואגולאז חיובי בשיטת המבחנה
  1. באמצעות כלי מתאים (פיפטה, טפי וכדומה) יש להרים 2-3 מושבות חיידקים מבודדות, נקיות וטריות מעל צלחת פטרי (24 שעות לאחר זריעה על מצע אגר) ולטבול אותן בתוך 0.5 מיליליטר פלזמה של ארנבת.
  2. יש לערבב את המושבות עם הפלזמה שבמבחנה עד ליצירת תערובת הומוגנית.
  3. את המבחנה יש להדגיר במשך 4 שעות בטמפרטורה של 35-37 מעלות צלזיוס.
  4. לאחר 4 שעות יש לבדוק את המבחנה לאיתור קריש פיברין הנראה לעין.
  • במידה ונוצר קריש פיברין הנראה לעין, אזי המיקרואורגניזם שנבדק יקרא קואגולאז-חיובי.
  • במידה ולא נוצר קריש פיברין הנראה לעין, יש להמשיך להדגיר את המבחנה בטמפרטורת החדר למשך 20 שעות נוספות:
  • במידה ונוצר קריש פיברין הנראה לעין, אזי המיקרואורגניזם יקרא קואגולאז-חיובי.
  • במידה ולא נוצר קריש פיברין הנראה לעין, אזי המיקרואורגניזם יקרא קואגולאז-שלילי.

שיטה זאת מיועדת לבדוק את נוכחות האיזופורם החופשי של הקואגולאז והיא מהווה אסמכתה סופית לקביעת נוכחותו של האנזים בחיידק הנבדק.

הערות לביצוע המבחן

תוצאות מבחן קואגולאז מהיר בשיטת אגלוטינציה עם חרוזי לטקס כחולים. בשיטה זאת נבדקת נוכחותו של קואגולאז קשור וכן חלבון A ‏(Protein A) הייחודי לחיידקי Staphylococcus aureus. היווצרות אגלוטינציה מעידה על תוצאה חיובית (דגימות 1-5) ואילו היעדר אגלוטינציה מעיד על תוצאה שלילית (דגימה 6)
  • קבלת תוצאה חיובית במבחן הזכוכית הנושאת מספיקה אמנם על מנת לקבוע כי המיקרואורגניזם הנבדק הוא קואגולאז-חיובי, אולם יש לזכור כי שיטה זאת מיועדת לבדוק את נוכחות האיזופורם הקשור של הקואגולאז. לפיכך מומלץ לבצע את המבחן גם בשיטת המבחנה.
  • קבלת אגלוטינציה במבחן הזכוכית הנושאת בטיפת הביקורת השלילית מעידה על אגלוטינציה עצמית (Autoagglutination). לפיכך לא ניתן להסתמך על תוצאות שיטה זאת ויש צורך לבצע את המבחן בשיטת המבחנה.
  • קבלת תוצאה שלילית בשיטת המבחנה מעידה אמנם על כך שהחיידק אינו מייצר קואגולאז, אולם מבחינה מיקרוביולוגית לא ניתן לשלול בוודאות מוחלטת קבלת תוצאה שלילית שגויה (False negative) ומקרים בהם מדובר בזני Staphylococcus aureus שלא מייצרים קואגולאז כלל. לכן במצב זה מומלץ לשלב ביצוע מבחנים ביוכימיים ומולקולריים נוספים לשם הזיהוי.
  • קבלת תוצאה חיובית חזקה, בשתי השיטות, רומזת אמנם על כך שהחיידק המדובר הוא, ככל הנראה, Staphylococcus aureus, אולם יש לזכור כי מינים אחרים בסוג Staphylococcus וכן חיידקים מסוימים בסוגים אחרים ידועים כמייצרי קואגולאז. לכן על מנת לקבוע בצורה חד משמעית את סוג ומין החיידק יש לשלב ביצוע מבחנים ביוכימיים ומולקולריים נוספים.
  • לא מומלץ להשתמש במושבות ישנות מעבר ל-24 שעות אחרי זריעה על מצע אגר, שכן תהליכי הזדקנות במושבה עלולים להוביל לקבלת תוצאות שליליות שגויות.
  • אין לחכות להתייבשות הטיפות בעת ביצוע שיטת הזכוכית הנושאת, שכן התייבשות הטיפות תגרום להופעת משקעים שעלולים להוביל לפענוח שגוי של המבחן כחיובי (False positive).
  • ייתכן מצב שבו לא ניתן יהיה לראות בבירור את תוצאות האגלוטינציה בעת ביצוע שיטת הזכוכית הנושאת. במצב זה יש להיעזר בזכוכית מגדלת.
  • שיטת המבחנה מהווה אסמכתה סופית לנוכחותו של הקואגולאז בחיידק הנבדק. אולם בדיקה בשיטה זאת עלולה להמשך עד 24 שעות. יכולת הבחנה מהירה של חיידקים ממין Staphylococcus aureus במעבדה מיקרוביולוגית קלינית נמצאת בחשיבות עליונה. לכן מפאת חיסכון בזמן מעדיפות מעבדות מיקרוביולוגיות קליניות רבות להשתמש במבחן קואגולאז מהיר בשיטת אגלוטינציה עם חרוזי לטקס. שיטה זאת משלבת בתוכה את איתורם של הקואגולאז הקשור וכן חלבונים ייחודיים אחרים ל-Staphylococcus aureus, דוגמת חלבון A ‏(Protein A). בשיטה זאת מתקבלת תוצאה מהירה גם במקרים בהם מדובר בזנים שלא מייצרים קואגולאז כלל[8].

סוגים ומינים של חיידקים קואגולאז-חיוביים

  • Staphylococcus[9]:
    • Staphylococcus aureus
    • Staphylococcus delphini
    • Staphylococcus hyicus
    • Staphylococcus intermedius
    • Staphylococcus lutrae
    • Staphylococcus pseudintermedius
    • Staphylococcus schleiferi
  • Yersinia:

ראו גם

קישורים חיצוניים

הערות שוליים

  1. ^ 1 2 3 4 Coagulase test protocol.
  2. ^ Patrick R. Murray, Ken S. Rosenthal, Michael A. Pfaller. Medical microbiology (5th ed.). Elsevier Mosby. 2005, p.223. ISBN 978-0323033039.
  3. ^ Miajlovic H, Loughman A, Brennan M, Cox D, Foster TJ. (2007). Both complement- and fibrinogen-dependent mechanisms contribute to platelet aggregation mediated by Staphylococcus aureus clumping factor B. Infection and Immunity. Jul;75(7):3335-43. PMID 17438032.
  4. ^ Vanassche T, Kauskot A, Verhaegen J, Peetermans WE, van Ryn J, Schneewind O, Hoylaerts MF, Verhamme P. (2012). Fibrin formation by staphylothrombin facilitates Staphylococcus aureus-induced platelet aggregation. Thrombosis and Haemostasis. Jun;107(6):1107-21. PMID 22437005.
  5. ^ 1 2 Coagulase Test: Principle, procedure and interpretation.
  6. ^ Moreillon P, Entenza JM, Francioli P, McDevitt D, Foster TJ, François P, Vaudaux P. (1995). Role of Staphylococcus aureus coagulase and clumping factor in pathogenesis of experimental endocarditis. Infection anf Immunity. Dec;63(12):4738-43. PMID 7591130.
  7. ^ Possible virulence determinants expressed in the pathogenesis of Staphylococcus aureus infections.
  8. ^ Personne P, Bes M, Lina G, Vandenesch F, Brun Y, Etienne J. (1997). Comparative performances of six agglutination kits assessed by using typical and atypical strains of Staphylococcus aureus. Journal of Clinical Microbiology. May;35(5):1138-40. PMID 9114395.
  9. ^ Sasaki T, Tsubakishita S, Tanaka Y, Sakusabe A, Ohtsuka M, Hirotaki S, Kawakami T, Fukata T, Hiramatsu K. (2010). Multiplex-PCR method for species identification of coagulase-positive staphylococci. Journal of Medical Microbiology. Mar;48(3):765-9. PMID 20053855.
  10. ^ Coagulase - US National Library of Medicine Medical Subject Headings (MeSH).

Read other articles:

1999 novel by Michael Collier For other uses, see Taint (disambiguation). The Taint AuthorMichael CollierSeriesDoctor Who book:Eighth Doctor AdventuresRelease number19SubjectFeaturing:Eighth Doctor Sam, Fitz KreinerPublisherBBC BooksPublication dateFebruary 1999ISBN0-563-55568-8Preceded byThe Face-Eater Followed byDemontage  The Taint (also called Doctor Who and the Taint) is an original novel credited to Michael Collier and based on the long-running British science fictio...

 

Artikel ini tidak memiliki referensi atau sumber tepercaya sehingga isinya tidak bisa dipastikan. Tolong bantu perbaiki artikel ini dengan menambahkan referensi yang layak. Tulisan tanpa sumber dapat dipertanyakan dan dihapus sewaktu-waktu.Cari sumber: SMK Mitra Kencana Jakarta – berita · surat kabar · buku · cendekiawan · JSTOR SMK MITRA KENCANA JakartaInformasiDidirikanJuli tahun 1996AkreditasiBMaskotBeriman dan BelajarKepala SekolahDrs. Ahmad S...

 

Canadian ice hockey player (born 1965) This biography of a living person needs additional citations for verification. Please help by adding reliable sources. Contentious material about living persons that is unsourced or poorly sourced must be removed immediately from the article and its talk page, especially if potentially libelous.Find sources: Russ Courtnall – news · newspapers · books · scholar · JSTOR (July 2023) (Learn how and when to remove this...

Shin-Keisei Dentetsu Co.,Ltd.JenisPublik KK (TYO: 9014)IndustriKereta api swastaDidirikanOctober 23, 1946KantorpusatKunugiyama, Kamagaya, Chiba, JepangTokohkunciTakayoshi Kasai (Presiden)Karyawan460 (2015)IndukKereta Listrik KeiseiAnakusahaBus Funabashi Shin-Keisei Bus Matsudo Shin-KeiseiSitus webwww.shinkeisei.co.jpThe Kereta Api Listrik Shin-Keisei (新京成電鉄code: ja is deprecated , Shin-Keisei Dentetsu) (新京成電鉄, Shin-Keisei Dentetsu?) (新京成電鉄, Shin-Keisei Dentetsu?)...

 

Hair product brand This article needs additional citations for verification. Please help improve this article by adding citations to reliable sources. Unsourced material may be challenged and removed.Find sources: Pantene – news · newspapers · books · scholar · JSTOR (April 2023) (Learn how and when to remove this message) PanteneProduct typeHair careOwner Procter & GambleProduced by Richardson Vicks (1985) Procter & Gamble (1985–present...

 

Questa voce sull'argomento calciatrici è solo un abbozzo. Contribuisci a migliorarla secondo le convenzioni di Wikipedia. Segui i suggerimenti del progetto di riferimento. Noemi Cortelli Nazionalità  Italia Calcio Ruolo Difensore Squadra svincolata CarrieraSquadre di club1 2000-2008 Roma CF140 (0)2009-2014 Res Roma59 (3)[1]2014-2015 Molassana Boero16 (0)2015-2018 Roma CF35 (2)[2]2018-2021 Roma CF27 (0) 1 I due numeri indicano le presenze e...

Takeshi Kusao (草尾 毅code: ja is deprecated , Kusao Takeshi, lahir 20 November 1971) adalah seiyu berkebangsaan Jepang. Dia dikenal dengan peran-perannya dari serial anime sebagai Trunks / Chibi Trunks dalam Dragon Ball Z, sebagai Hanamichi Sakuragi dalam Slam Dunk, sebagai Lamune dalam NG Knight Lamune & 40, sebagai Ryo Sanada dalam Ronin Warriors, dan sebagai Dororo dalam Keroro. Juga dia suara sebagai Kabutack / Profesor Jun'ichiro Kokuritsu dalam serial tokusatsu B-Robo Kabutack. ...

 

Indian actress (born 1951) This biography of a living person needs additional citations for verification. Please help by adding reliable sources. Contentious material about living persons that is unsourced or poorly sourced must be removed immediately from the article and its talk page, especially if potentially libelous.Find sources: Bindu actress – news · newspapers · books · scholar · JSTOR (October 2012) (Learn how and when to remove this mess...

 

莎拉·阿什頓-西里洛2023年8月,阿什頓-西里洛穿著軍服出生 (1977-07-09) 1977年7月9日(46歲) 美國佛羅里達州国籍 美國别名莎拉·阿什頓(Sarah Ashton)莎拉·西里洛(Sarah Cirillo)金髮女郎(Blonde)职业記者、活動家、政治活動家和候選人、軍醫活跃时期2020年—雇主內華達州共和黨候選人(2020年)《Political.tips》(2020年—)《LGBTQ國度》(2022年3月—2022年10月)烏克蘭媒...

Overview of the status of women in Nigeria For the political interest organization, see Women in Nigeria (organization). Not to be confused with Women in Niger. This article needs additional citations for verification. Please help improve this article by adding citations to reliable sources. Unsourced material may be challenged and removed.Find sources: Women in Nigeria – news · newspapers · books · scholar · JSTOR (November 2021) (Learn how and when t...

 

Chesapeake, VirginiaKota mandiriCity of ChesapeakeGreat Dismal Swamp Canal BenderaLambangMotto: One Increasing PurposeLokasi di Negara Bagian VirginiaNegara Amerika SerikatNegara bagianlbs Persemakmuran VirginiaRichmond (ibu kota)Topik Climate Colleges and universities Colony Congressional Districts Delegations Demographics Economy Geography Government Governors History Historic Landmarks Homes Music People Police Politics Rights Rivers School divisions Scouting Slogan Sports t...

 

Borgol Borgol jempol Borgol kuno Borgol adalah alat penahan yang dirancang untuk menyatukan kedua pergelangan tangan seseorang. Terdiri dari dua gelang yang dihubungkan dengan rantai pendek, setiap gelang dapat dibuka dan ditutup dengan kunci. Pemborgolan biasanya dilakukan untuk mencegah seseorang melarikan diri dari tahanan. Ada juga borgol kaki, borgol tangan yang memiliki borgol jempol, dan lain-lain. Borgol dapat dibuat dari baja tahan karat, baja karbon, aluminium, atau polimer. PlastiC...

1971 comedy-drama film directed by Peter Locke You've Got to Walk It Like You Talk It or You'll Lose That BeatSoundtrack album coverDirected byPeter LockeWritten byPeter LockeProduced byPeter Locke Gary MehlmanStarringZalman KingRichard PryorAllen GarfieldRobert Downey Sr.Liz TorresStan GottliebDaisy LockeRoz KellySuzette GreenEdited byWes CravenMusic byThe Original Soundtrack(Walter BeckerDonald Fagen)Distributed byJ.E.R. PicturesRelease date September 19, 1971 (1971-09-19) Ru...

 

Запрос «Луи II» перенаправляется сюда; см. также другие значения. Луи II Князь Монако Луи II Князь Монако 27 июня 1922 — 9 мая 1949 Предшественник Альбер I Преемник Ренье III Рождение 12 июля 1870(1870-07-12)Баден-Баден, Германия Смерть 9 мая 1949(1949-05-09) (78 лет)Монако Место погребения соб...

 

دورلينج كيندرسليDorling Kindersley (بالإنجليزية) الشعارمعلومات عامةالبلد  المملكة المتحدة التأسيس 1974[1] النوع شركة لنشر الكتب[1] الشكل القانوني شركة التوصية بالأسهم[2] المقر الرئيسي لندن موقع الويب dk.com (الإنجليزية) المنظومة الاقتصاديةالصناعة نشر تعديل - تعديل مصدري -...

Pour un article plus général, voir Système électoral. Exemple de bulletin de vote utilisé en 2016 à Canberra. Les candidats d'un même parti sont regroupés en colonnes. Le scrutin à vote unique transférable (ou système de Hare) est un système électoral destiné à élire plusieurs candidats, inventé indépendamment vers 1860 par Thomas Hare et Carl Andrae. Ce système à tendance proportionnelle est similaire au vote à second tour instantané, à la différence qu'il s'applique...

 

Palasport Mario RadiPalaRadi, palasport Ca' de' Somenzi Informazioni generaliStato Italia UbicazioneP.le Zelioli Lanzini 1[1]Cremona Inizio lavori1980 Inaugurazione1980 Ristrutturazione1984, 2009 ProprietarioComune di Cremona Informazioni tecnichePosti a sedere3 519 StrutturaPalazzetto dello Sport Mat. del terrenoParquet Uso e beneficiariPallacanestro Vanoli Cremona JuVi Cremona Pallavolo Casalmaggiore Esperia Mappa di localizzazione Modifica dati su Wiki...

 

Leeds Tramways CompanyTrams on BriggateOperationLocaleLeedsOpen16 September 1871Close2 February 1894StatusClosedInfrastructureTrack gauge4 ft 8+1⁄2 in (1,435 mm)Propulsion system(s)Horse and steamStatisticsRoute length14.16 miles (22.79 km) Leeds Tramways Company operated a tramway service in Leeds between 1871 and 1894.[1] History The Leeds Tramways Order 1871 authorised the Leeds Tramways Company to construct tramway lines in Leeds. The first route op...

Institut français d'AllemagneHistoireFondation 2001CadreType Centre culturelPays  AllemagneOrganisationSite web www.institutfrancais.demodifier - modifier le code - modifier Wikidata L'Institut français d'Allemagne regroupe les différents établissements de la présence culturelle française en Allemagne. Dans sa forme actuelle, il existe depuis 2009 et a fusionné le 1er janvier 2012 avec le Service culturel de l'Ambassade de France à Berlin[1]. Son but est de promouvoir les échang...

 

2017 novel by Gail Honeyman Eleanor Oliphant Is Completely Fine Paperback first edition (UK)AuthorGail HoneymanAudio read byCathleen McCarronLanguageEnglishSubjectssocial isolation • trauma • loneliness • alcoholism • intergenerationality • love • mental health • domestic abuse • schizoid personality • obsession • projection • suicide • disillusionment • recoveryGenreliterary fictionPublisherHarperCollins (UK)Pamela Dorman Books (US)Viking Press (CAN)Public...