נקודה איזואלקטרית

המונח "PI" מפנה לכאן. לערך העוסק ביחס הקבוע בין היקף המעגל לקוטרו, ראו פאי.
התוצאות המתקבלות מאלקטרופורזה דו-ממדית בג'ל. לאורך ציר ה-X מתמיינים החלבונים לפי הנקודה האיזואלקטרית שלהם, ולאורך ציר ה-Y - לפי משקלם המולקולרי

בביוכימיה ובכימיה אנליטית, הנקודה האיזואלקטרית (pI, קיצור באנגלית של Point Isoelectric) של מולקולה היא ערך ה-pH בו נטו המטען של המולקולה הוא אפס אבל היא טעונה במטענים נקודתיים מהקבוצות הפונקציונליות השונות. המונח מתייחס בדרך-כלל לחלבונים.

חומצות האמינו, המרכיבות את החלבונים, עשויות להיות בעלות מטען חשמלי. ישנן מספר קבוצות פונקציונליות המופיעות בחומצות האמינו אשר עשויות לקבל מטען חשמלי:

  • קבוצת הקרבוקסיל (COOH) עשויה לאבד את אטום המימן שלה ולהפוך ליון קרבוקסילט (-COO), בעל מטען שלילי של 1-.
  • קבוצת האמין (NH2) עשויה לקלוט אטום מימן ולהפוך ליון אמין (+NH3), בעל מטען חיובי של 1+.
  • קבוצת הידרוקסיל (OH) וקבוצת סולפהידריל (SH) הן חומצות חלשות מאוד ולכן כמו האספרטית והגלוטמית גם הן מסוגלות לקלוט אטום מימן ולהפוך לאיזואלקטריים כאשר ה- pH יורד מתחת ל-pK שלהן.

קיימות 7 חומצות אמינו בעלות שיירים מסוג זה, העשויים לקבל מטען חשמלי:

  • שתי חומצות האמינו החומציות - חומצה אספרטית וחומצה גלוטמית - מכילות קבוצת קרבוקסיל בשייר שלהן. קבוצה זו מסוגלת להפוך ליון שלילי ב- pH נמוך יחסית.
  • שלוש חומצות האמינו הבסיסיות - ליזין, ארגינין והיסטידין - מכילות קבוצת אמין בשייר שלהן. קבוצה זו מסוגלת להפוך ליון חיובי.
  • השייר של טירוזין מכיל הידרוקסיל, והשייר של ציסטאין מכיל סולפהידריל. קבוצות אלו מסוגלות להפוך ליון שלילי אבל רק ב- pH גבוה יחסית, כלומר הן חומצות חלשות.

איבוד וקליטת אטומי המימן תלויים באופן הדוק ברמת החומציות (ה-pH) בסביבה בה נמצאת חומצת האמינו. בסביבה חומצית קיים עודף של יוני מימן, והם מגיבים עם מולקולות המים ליצירת יוני הידרוניום, +H3O. יוני ההידרוניום אינם יציבים ונוטים למסור את יון המימן שלהם לכל מולקולה ה"מוכנה" לקבלו. לפיכך, בסביבה חומצית, קיים סיכוי גבוה שקבוצות הקרבוקסיל של חומצות האמינו יכילו אטום מימן (כלומר, יופיעו בצורה הנייטרלית COOH ללא מטען חשמלי), ושקבוצות האמין, ההידרוקסיל והסולפהידריל יכילו אף הן אטום מימן עודף ויופיעו בצורתן החיובית, +NH3 לדוגמה.

בסביבה בסיסית, לעומת זאת, קיים עודף של יוני הידרוקסיד (-OH). יונים אלו מושכים אליהם בחוזקה יוני מימן. לפיכך, בסביבה בסיסית, קיים סיכוי גבוה שקבוצות הקרבוקסיל של חומצות האמינו יאבדו אטום מימן (כלומר, יופיעו עם מטען שלילי -COO), ושקבוצות האמין, ההידרוקסיל והסולפהידריל יאבדו אף הן אטום מימן אחד ויופיעו בצורתן הנייטרלית, NH2 לדוגמה.

כדי לחשב את המטען הכולל של חומצת אמינו יש לחבר את סך המטענים הקיימים בה ב-pH מסוים. לדוגמה, ברמת pH של 12 חומצה אספרטית מאבדת יוני מימן מכל הקבוצות האפשריות. ב-pH זה, אם כן, קבוצת הקרבוקסיל שלה שלילית, קבוצת האמין נייטרלית ושייר הקרבורסיל שלילי אף הוא. המטען הכולל של חומצה אספרטית ברמת pH של 12 הוא, לפיכך, 2-.

חישוב הנקודה האיזואלקטרית

על מנת לחשב את הנקודה האיזואלקטרית נעשה ממוצע על ערכי ה־pKa של החומר.
תחילה נבדוק באיזה pH לפפטיד יש מטען -1 ובאיזה pH לפפטיד יש מטען +1.
בחישוב ה pI ניקח את הpKa בהם המטען מתחלף מחיובי לשלילי. לדוגמה:
עבור ליזין

מיקוד איזואלקטרי

מיקוד איזואלקטרי הוא שיטה אנליטית לקביעת ה-pI של חלבונים, וכן להפרדת חלבונים לפי ההבדל ב-pI שלהם תוך שימוש באלקטרופוריזה. בשיטת המיקוד האיזואלקטרי יוצקים על פני משטח זכוכית או פלסטיק ג'ל שבו יוצרים שכבות של חומציות שונה על ידי שימוש בחומצות ובסיסים אורגניים בעלי נקודה איזואלקטרית שונה. בעבר היה מקובל לצקת את הג'ל בתוך צינוריות אך בשנים האחרונות שיטה זו לא מקובלת יותר ורוב המשתמשים בשיטה זו יוצקים את הג'ל על פני משטחי פלסטיק שאליהם מתפלמר הג'ל בקשרים קוולנטיים. החומרים בעלי הנקודה האיזואלקטרית השונה שהוספו לג'ל גם הם נקשרים לג'ל בקשרים קוולנטיים. על פני שכבת הג'ל מוסיפים תערובת של חלבונים ומפעילים מתח חשמלי גבוהה הגורם לכל חלבון לנוע בתוך הג'ל לפי המטען החשמלי שלו, הנקבע לפי ה- pH בסביבתו הקרובה. כך כל חלבון ינדוד למקום בג'ל שבו ה- pH שווה ל-pI של אותו חלבון ושם הוא יעצור. כך נפרדים החלבונים תוך תנועה בשדה אלקטרופורטי עד שהם עוצרים בנקודה האיזואלקטרית שלהם. ניתן לשלב בין מיקוד איזואלקטרי ואלקטרופורזה רגילה של חלבונים המשתמשת ב-SDS כדטרגנט, לשיטה הנקראת אלקטרופורזה דו-ממדית בג'ל ומשמשת להפרדת חלבונים על ג'ל. השיטה המשולבת, אשר הומצאה בשנת 1975, מדויקת ויעילה בהרבה משתי השיטות כשהן מיושמות בנפרד והיא מאפשרת הפרדה בין אלפי חלבונים שונים בניסוי אחד.

ראו גם

קישורים חיצוניים

Read other articles:

Abdul Qadir Baraja

Artikel ini bukan mengenai Abdulkadir Baraja. Abdul Qadir Hasan Baraja (lahir 10 Agustus 1944) merupakan pemimpin Komando Jihad, musuh utama pemerintah dan tentara Indonesia di tahun 80-an, dan pemimpin Khalifah Khilafatul Muslimin, sebuah organisasi yang namanya mencuat akibat salah satu anggotanya ditangkap Densus 88 terkait gerakan teror. Ia lahir di Taliwang, Sumbawa, Nusa Tenggara Barat. Ia mengawali pendidikannya di Gontor lalu melanjutkan tinggal di Lampung. Ia dikenal dengan pergeraka...

 

Gattendorf

Gattendorf Lambang kebesaranLetak Gattendorf di Hof NegaraJermanNegara bagianBayernWilayahOberfrankenKreisHofMunicipal assoc.Feilitzsch Subdivisions15 OrtsteilePemerintahan • MayorStefan Müller (CSU)Luas • Total22,18 km2 (856 sq mi)Ketinggian544 m (1,785 ft)Populasi (2013-12-31)[1] • Total1.036 • Kepadatan0,47/km2 (1,2/sq mi)Zona waktuWET/WMPET (UTC+1/+2)Kode pos95185Kode area telepon09281Pelat kendara...

 

List of senators of Alpes-Maritimes

Location of Alpes-Maritimes in France Following is a list of senators of Alpes-Maritimes, people who have represented the department of Alpes-Maritimes in the Senate of France. Third Republic Senators for Alpes-Maritimes under the French Third Republic were:[1] Term Name 1876–1882 Joseph Garnier 1876–1885 Charles Dieudé-Defly 1882–1900 Léon Chiris 1885–1894 Léon Renault 1894–1902 Alfred Borriglione 1900–1903 Charles Bérenger 1902–1911 Maurice Rouvier 1903–1922 Hon...

2010 Eureka earthquake

January 2010 earthquake in California 2010 California earthquake redirects here. For the April earthquake affecting Southern California, see 2010 Baja California earthquake. 2010 Eureka earthquakeSanta CruzRenoEurekaUTC time2010-01-10 00:27:41ISC event14223208USGS-ANSSComCatLocal dateJanuary 9, 2010 (2010-01-09)Local time16:27:38 PSTDuration~10 seconds at King Salmon[1]Magnitude6.5 Mw[2]Depth13.5 miles (21.7 km)Epicenter40°39′N 124°4...

 

Pemerintah Provinsi Daerah Khusus Ibukota Jakarta

Pemerintah ProvinsiDaerah Khusus Ibukota JakartaDasar hukumUU Nomor 29 Tahun 2007Kepala daerahGubernurHeru Budi Hartono (Penjabat)Dewan perwakilan rakyat daerahKetuaPrasetyo Edi MarsudiPerangkat daerahSekretariat daerahJoko Agus Setyono Sekda (Sekretaris Daerah)Sekretariat DPRDDrs. Firmansyah, M.Pd (Sekretaris DPRD)InspektoratSyaefuloh Hidayat, S.S.T., M.AP (Inspektur)Jumlah dinas-Jumlah badan-Pembagian administratifJumlah kota administrasi5Jumlah kabupaten administrasi1Jumlah kecamatan44Apar...

 

Hubungan Amerika Serikat dengan Bosnia dan Herzegovina

Hubungan Bosnia dan Herzegovina–Amerika Serikat Bosnia dan Herzegovina Amerika Serikat Misi diplomatik Kedutaan Besar Bosnia dan Herzegovina, Washington, D.C. Kedutaan Besar Amerika Serikat, Sarajevo Utusan Duta Besar Bojan Vujić Duta Besar Eric Nelson Hubungan Bosnia dan Herzegovina–Amerika Serikat adalah hubungan bilateral antara Bosnia dan Herzegovina dan Amerika Serikat. Hubungan bilateral antara dua negara tersebut dianggap sangat kuat. Referensi  Artikel ini berisi bahan...

世界政區索引

此條目可能包含不适用或被曲解的引用资料，部分内容的准确性无法被证實。 (2023年1月5日)请协助校核其中的错误以改善这篇条目。详情请参见条目的讨论页。 各国相关 主題列表 索引 国内生产总值 石油储量 国防预算 武装部队（军事） 官方语言 人口統計 人口密度 生育率 出生率 死亡率 自杀率 谋杀率 失业率 储蓄率 识字率 出口额 进口额 煤产量 发电量 监禁率 死刑 国债 ...

 

Bangladesh National Film Award for Best Female Playback Singer

Female film playback singer award This article needs additional citations for verification. Please help improve this article by adding citations to reliable sources. Unsourced material may be challenged and removed.Find sources: Bangladesh National Film Award for Best Female Playback Singer – news · newspapers · books · scholar · JSTOR (December 2016) (Learn how and when to remove this message) Bangladesh National Film Awards for Best Female Playback S...

 

Sierra Vicuña Mackenna

Cordillera Vicuña MackennaCerro Armazones is a mountain located in the Sierra Vicuña Mackenna.Highest pointPeakCerro Vicuña MackennaElevation3,114 m (10,217 ft)Coordinates24°27′S 70°03′W / 24.450°S 70.050°W / -24.450; -70.050DimensionsLength170 km (110 mi) north-southGeographyCountryChileRange coordinates24°30′S 69°00′W / 24.500°S 69.000°W / -24.500; -69.000Parent rangeChilean Coast Range The Cordi...

Raven Johnson

American basketball player Raven JohnsonJohnson with South Carolina in 2023No. 25 – South Carolina GamecocksPositionGuardLeagueSoutheastern ConferencePersonal informationBorn (2003-03-04) March 4, 2003 (age 21)Atlanta, Georgia, U.S.Listed height5 ft 8 in (1.73 m)Career informationHigh schoolWestlake (Atlanta, Georgia)CollegeSouth Carolina (2021–present)Career highlights and awards Second-team All-SEC (2024) SEC All-Freshman Team (2023) 2× NCAA champion (2022, ...

 

Burghal Hidage

Deed A map of places named in the Burghal Hidage The Burghal Hidage (/ˈbɜːrɡəl ˈhaɪdɪdʒ/) is an Anglo-Saxon document providing a list of over thirty fortified places (burhs), the majority being in the ancient Kingdom of Wessex, and the taxes (recorded as numbers of hides) assigned for their maintenance.[1] The document, so named by Frederic William Maitland in 1897, survives in two versions of medieval and early modern date.[1][2] Version A, Cotton Otho B.xi w...

 

商科

此條目没有列出任何参考或来源。 (2012年12月5日)維基百科所有的內容都應該可供查證。请协助補充可靠来源以改善这篇条目。无法查证的內容可能會因為異議提出而被移除。 商科，是指教育體系中對商業有關科目的統稱，有關商業上會用的數式，用學科去解釋現今市場的情況，分析商界會用的宏觀策略，包括的科目有經濟、商業、會計、市場學、管理、財務、統計學等。 �...

Transcranial direct-current stimulation

Technique of brain electric stimulation therapy Transcranial direct-current stimulationAnodal tDCS administration. Anodal (b) and cathodal (c) electrodes with 35 cm2 size are put on F3 and right supraorbital region, respectively. A head strap is used (d) for convenience and reproducibility, and a rubber band (e) for reducing resistance.MeSHD065908[edit on Wikidata] Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a form of neuromodulation that uses constant, low direct current delivered ...

 

Amaradasa Ratnapala

Ceylonese physician and politician Amaradasa Ratnapala (8 January 1903 - 13 October 2001) was a Ceylonese physician, a former member of Parliament[1] and scholar of Buddhist Philosophy, whose book on Abhidharmartha Pradeepeka is a commentary on the doctrine. Ratnapala received his education at S. Thomas' College, Mount Lavinia, where he excelled in schoolboy cricket. In May 1937 he was elected to the Colombo Municipal Council representing Slave Island and was subsequently elected to t...

 

Aaron Lynch (American football)

American gridiron football player (born 1993) American football player Aaron LynchLynch with the Chicago Bears in 2019Personal informationBorn: (1993-02-08) February 8, 1993 (age 31)Cleveland, Ohio, U.S.Height:6 ft 5 in (1.96 m)Weight:285 lb (129 kg)Career informationHigh school:Island Coast(Cape Coral, Florida)College:Notre Dame (2011)South Florida (2012–2013)Position:Defensive endNFL draft:2014 / Round: 5 / Pick: 150Career history San Fran...

UFC Fight Night: Volkan vs. Smith

UFC Fight Night: Volkan vs. SmithProdotto daUltimate Fighting Championship Data27 ottobre 2018 Città Moncton SedeAvenir Centre Spettatori6 282[1] Cronologia pay-per-viewUFC 229: Khabib vs. McGregorUFC Fight Night: Volkan vs. SmithUFC 230: Cormier vs. Lewis Progetto Wrestling Manuale UFC Fight Night: Volkan vs. Smith (conosciuto anche come UFC Fight Night 138) è stato un evento di arti marziali miste tenuto dalla Ultimate Fighting Championship il 27 ottobre 2018 all'Avenir Centr...

 

Douglas C-133 Cargomaster

C-133 Cargomaster Douglas C-133B Cargomaster Kiểu Máy bay vận tải quân sự Nguồn gốc Hoa Kỳ Nhà chế tạo Douglas Aircraft Company Chuyến bay đầu 23 tháng 4 năm 1956 Thải loại 1971 Sử dụng chính Không quân Hoa KỳNASA Giai đoạn sản xuất 1956-1961 Số lượng sản xuất 50 Douglas C-133 Cargomaster là một loại máy bay chở hàng cỡ lớn được hãng Douglas Aircraft Company chế tạo giai đoạn 1956-1961 cho Không quân Hoa Kỳ...

 

5-Hydroxyisourate

5-Hydroxyisourate Names IUPAC name 5-hydroxy-3,7-dihydropurine-2,6,8-trione Identifiers CAS Number 6960-30-1 Y 3D model (JSmol) Interactive imageInteractive image ChEBI CHEBI:18072 Y ChemSpider 219288 Y KEGG C11821 Y MeSH 5-Hydroxyisourate PubChem CID 250388 UNII DU6PJ7L9BX Y CompTox Dashboard (EPA) DTXSID10290591 InChI InChI=1S/C5H4N4O4/c10-2-5(13)1(6-3(11)8-2)7-4(12)9-5/h13H,(H3,6,7,8,9,10,11,12) YKey: LTQYPAVLAYVKTK-UHFFFAOYSA-N YInChI=1/C5H4N4O4/c1...

Giovanni Lanzalone

Questa voce o sezione sull'argomento poeti italiani non cita le fonti necessarie o quelle presenti sono insufficienti. Puoi migliorare questa voce aggiungendo citazioni da fonti attendibili secondo le linee guida sull'uso delle fonti. Segui i suggerimenti del progetto di riferimento. Tomba di Giovanni Lanzalone conservata nel cimitero di Salerno. Giovanni Lanzalone (Vallo della Lucania, 21 febbraio 1852 – Salerno, 12 maggio 1936) è stato un poeta, critico letterario e scrittore itali...

 

Gỗ

Gỗ mẫu  Thông   Vân sam   Thông rụng lá   Bách xù   Aspen   Cây Trăn   Bạch dương   Xích dương   Cử   Sồi   Du   Anh đào dại   Lê châu Âu   Phong   Đoạn lá nhỏ   Tần Bì  Mặt cắt ngang của một cây gỗ thanh tùng châu Âu (Taxus baccata). Gỗ là một dạng tồn tại vật chất...