L'U-394 est un sous-marin océanique de type VII C. Construit dans les chantiers de Howaldtswerke AG à Kiel, la quille du U-394 est posée le et il est lancé le . L'U-394 entre en service un mois et demi plus tard.
Il réalise sa première patrouille de guerre en quittant le port de Narvik le sous les ordres du KapitänleutnantWolfgang Borger. Après 38 jours en mer, il arrive à Hammerfest le .
Le , il appareille de Hammerfest pour sa deuxième patrouille. Après 38 jours en mer, il est coulé le dans la mer de Norvège au sud-est de l'Île Jan Mayen à la position géographique de 69° 47′ N, 4° 10′ E par des tirs de roquettes et des charges de profondeurs lancés d'un avion Fairey Swordfish (Squadron 825 FAA/V) du porte-avions d'escorte britannique HMS Vindex, des destroyers britanniques HMS Keppel et HMS Whitehall et des sloops britanniques HMS Mermaid et HMS Peacock.
Les 50 hommes d'équipage meurent dans cette attaque.
Chris Bishop, historien militaire (trad. de l'anglais par Christian Muguet), Les sous-marins de la Kriegsmarine : 1939-1945 : le guide d'identification des sous-marins [« The spellmount submarine identification guide : Kriegsmarine U-boats 1939-1945 »], Paris, Éd. de Lodi, , 192 p. (ISBN978-2-84690-327-1, OCLC470721805, BNF41298980)