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Le diagnostic de l'herpès est en principe établi à l'examen clinique. Le diagnostic de la syphilis nécessite une confirmation biologique. Le diagnostic du chancre mou est difficile (examen direct au niveau du chancre et du bubon + culture). Le diagnostic de la donovanose repose sur la mise en évidence de corps de Donovan à l'examen direct. La lymphogranulomatose vénérienne est diagnostiquée par PCR.