Méthode du biuret

La méthode du biuret est une méthode de dosage colorimétrique des protéines.

Principe

Complexe entre le cuivre alcalin et les liaisons peptidiques

En milieu alcalin, les protéines qui possèdent au moins 4 liaisons peptidiques forment avec les ions cuivre II (Cu2+) un complexe bleu-violet dont l'intensité de la couleur est proportionnelle à la concentration en protéines. Cette coloration varie également en fonction de la nature des protéines à doser, de l’alcalinité du milieu, de la concentration en sulfate de cuivre et de la température. Un dosage colorimétrique est donc possible à 540 nm. Le réactif de coloration utilisé est le réactif de Gornall, composé :

  • de sulfate de cuivre, qui donne la coloration bleu du réactif due aux ions cuivre à 3 mmol/L ;

Mode opératoire

Le protocole à suivre pour réaliser un dosage par la méthode du biuret est le suivant : mélanger 3 ml du réactif de Gornall à 2 ml de différentes solutions protéiques de concentrations connues. Incuber ensuite à 37 °C pendant 30 min à l’obscurité. Laisser refroidir puis mesurer les absorbances des solutions à 540 nm. Ceci permet d’obtenir une gamme étalon et de tracer la courbe étalon afin de déterminer la concentration en protéines d’une solution inconnue traitée de la même manière.

Avantages

Cette méthode peut être utilisée pour un dosage qualitatif, qui peut être quantitatif lorsque l’on dispose de solutions de protéines pures. Elle est qualitative puisque le maximum d'absorption de la coloration varie avec le nombre de liaisons peptidiques présentes dans la molécule. Elle est quantitative parce que l'intensité de l'absorption est proportionnelle à la concentration protidique.

Enfin, elle est relativement rapide et peu onéreuse face à la méthode de Kjeldahl qui requiert, au préalable, une minéralisation des protéines.

Inconvénients

Cette méthode possède un seuil de quantification élevé (0,6 mg par litre), et nécessite donc que la solution à étudier soit assez concentrée. De plus, cette réaction spécifique des polypeptides, peut également se produire avec des tripeptides et fausser les mesures. Elle n’est pas non plus utilisable pour le dosage des glycoprotéines. Enfin, la présence d’ammoniac dans la solution inconnue peut interférer avec la réaction en formant des complexes avec le cuivre et fausser les résultats.

Gamme étalon de la tyrosine

Une durée de réaction d'environ 30 minutes à l'obscurité est nécessaire à l'obtention d'une coloration stable. La lecture étant spectrophotométrique, il faut cependant réaliser une gamme d'étalonnage ainsi que des témoins de compensation adaptés.

Utilisation

  • Cette méthode permet d'obtenir un dosage rapide des protéines. Contrairement à la méthode de Kjeldahl (qui reste une méthode de référence légale), les protéines sont dosées sans minéralisation. La technique est donc plus facile à mettre en place et aussi moins onéreuse.
  • Le dosage des protéines n'est pas applicable sur le lait car le lactose interfère dans le dosage (il réduit les ions cuivre (II)), et les protéines et le lactose ne peuvent être séparés.

Voir aussi

Read other articles:

Mo Brooks Morris Jackson Mo Brooks Jr.[1] (lahir 29 April 1954) adalah seorang jaksa dan politikus Amerika Serikat. Ia menjabat sebagai anggota DPR sejak 2011. Setelah Joe Biden memenangkan pemilihan presiden Amerika Serikat 2020 dan Donald Trump menolak untuk menyerah, Brooks dengan gigih membela Trump dan membuat klaim palsu tentang adanya kecurangan dalam pemilu. Dia menjadi anggota Kongres pertama yang mengumumkan keberatannya atas pengesahan hasil Electoral College.[2] ...

 

Gerardus GulUskup Agung Katolik Lama UtrechtGerejaGereja Katolik LamaKeuskupan agungUtrechtMasa jabatan1875–1892PendahuluJohannes HeykampPenerusFranciscus KenninckImamatTahbisan imam1870Tahbisan uskup11 Mei 1892oleh Casparus Johannes RinkelInformasi pribadiLahir(1847-10-27)27 Oktober 1847Egmond aan ZeeWafat9 Februari 1920(1920-02-09) (umur 72)UtrechtKewarganegaraanBelandaDenominasiKatolik LamaOrang tuaJan Gul, Angel Tol Gerardus Gul (27 Oktober 1847 – 9 Februari 19...

 

Salvia forsskaolei Klasifikasi ilmiah Kerajaan: Plantae (tanpa takson): Angiospermae (tanpa takson): Eudicots Ordo: Lamiales Famili: Lamiaceae Genus: Salvia Spesies: Salvia forsskaolei Nama binomial Salvia forsskaoleiL. Salvia forsskaolei adalah spesies tumbuhan yang tergolong ke dalam famili Lamiaceae. Spesies ini juga merupakan bagian dari ordo Lamiales. Spesies Salvia forsskaolei sendiri merupakan bagian dari genus Salvia.[1] Nama ilmiah dari spesies ini pertama kali diterbitkan o...

العلاقات التوفالية الدومينيكية توفالو دومينيكا   توفالو   دومينيكا تعديل مصدري - تعديل   العلاقات التوفالية الدومينيكية هي العلاقات الثنائية التي تجمع بين توفالو ودومينيكا.[1][2][3][4][5] مقارنة بين البلدين هذه مقارنة عامة ومرجعية للدولتين: و�...

 

Symbol of Ukrainian resistance to Russia You can help expand this article with text translated from the corresponding article in Ukrainian. Click [show] for important translation instructions. Machine translation, like DeepL or Google Translate, is a useful starting point for translations, but translators must revise errors as necessary and confirm that the translation is accurate, rather than simply copy-pasting machine-translated text into the English Wikipedia. Consider adding a topic to t...

 

Gambar zodiak dari abad ke-16 Secara astronomi, Zodiak atau mintakulburuj adalah sebuah sabuk khayal langit dengan lebar 18° yang dilintasi orbit matahari, bulan dan planet-planet, terbagi ke dalam 12 bagian mewakili 12 rasi bintang yang populer dilambangkan simbol-simbol mitologi hewan. Dalam bidang astrologi, zodiak berkaitan dengan pengamatan kedudukan benda-benda langit yang memiliki pengaruh spesifik kepada kepribadian manusia, kejadian alam dan fenomena perubahan di bumi. Istilah 'zodi...

American college basketball season 2008–09 Maryland Terrapins men's basketballNCAA Tournament, Round of 32ConferenceAtlantic Coast ConferenceRecord21–14 (7–9 ACC)Head coachGary WilliamsAssistant coachKeith BoothChuck DriesellRobert EhsanTroy WainwrightHome arenaComcast CenterSeasons← 2007–082009–10 → 2008–09 ACC men's basketball standings vte Conf Overall Team W   L   PCT W   L   PCT No. 2 North Carolina 13 – 3   .813 ...

 

Chemical compound 3-(p-Fluorobenzoyloxy)tropaneClinical dataRoutes ofadministrationinsufflatedLegal statusLegal status DE: Anlage II (Authorized trade only, not prescriptible) Identifiers IUPAC name (1R,5S)-(8-methyl-8-azabicyclo[3.2.1]octan-3-yl) 4-fluorobenzoate CAS Number172883-97-5 YPubChem CID5147770ChemSpider4321292 YUNIIMQP3G94388Chemical and physical dataFormulaC15H18FNO2Molar mass263.312 g·mol−13D model (JSmol)Interactive image SMILES CN1C2CC(OC(C3=CC=C(F)C=C3)...

 

Si ce bandeau n'est plus pertinent, retirez-le. Cliquez ici pour en savoir plus. Cet article peut contenir un travail inédit ou des déclarations non vérifiées (avril 2021). Vous pouvez aider en ajoutant des références ou en supprimant le contenu inédit. Voir la page de discussion pour plus de détails. Millebosc Mairie. Blason Administration Pays France Région Normandie Département Seine-Maritime Arrondissement Dieppe Intercommunalité Communauté de communes des Villes Sœurs Maire ...

Putra UmaLahirPutra Aria Abu Jafar14 Juli 1997 (umur 26)Jakarta, IndonesiaNama lainPutra UmaPekerjaanpelawak tunggal, mahasiswaTahun aktif2014 - sekarang Putra Aria Abu Jafar atau yang dikenal dengan nama panggung Putra Uma (lahir 14 Juli 1997) adalah seorang Pelawak tunggal berkebangsaan Indonesia. Pelawak tunggal atau komika yang dikenal dengan wajahnya yang unik serta rambutnya yang keriting panjang hingga kribo ini adalah salah satu komika jebolan komunitas Stand Up Indo B...

 

هذه المقالة يتيمة إذ تصل إليها مقالات أخرى قليلة جدًا. فضلًا، ساعد بإضافة وصلة إليها في مقالات متعلقة بها. (مارس 2019) أوقست كوسكينين (بالفنلندية: August Koskinen)‏  معلومات شخصية تاريخ الميلاد 17 نوفمبر 1878   تاريخ الوفاة 24 أكتوبر 1949 (70 سنة)   مواطنة فنلندا  الحياة العملية الم�...

 

JanggalaDesaNegara IndonesiaProvinsiJawa BaratKabupatenTasikmalayaKecamatanSukarajaKode pos46183Kode Kemendagri32.06.17.2006 Luas2,57 km²Jumlah penduduk5.055 jiwaKepadatan1.967 jiwa/km² Janggala adalah sebuah desa di kecamatan Sukaraja, Tasikmalaya, Jawa Barat, Indonesia. Saat ini, desa ini dikepalai oleh bapak sani ( 2023-Sekarang ).[butuh rujukan] Batas wilayah Utara: Desa Sukapura Selatan: Desa Sirnajaya Barat: Desa Sukapura Timur: Sungai Ciwulan dan Desa Sukakerta, Kecamata...

† Большая гавайская древесница Научная классификация Домен:ЭукариотыЦарство:ЖивотныеПодцарство:ЭуметазоиБез ранга:Двусторонне-симметричныеБез ранга:ВторичноротыеТип:ХордовыеПодтип:ПозвоночныеИнфратип:ЧелюстноротыеНадкласс:ЧетвероногиеКлада:АмниотыКлада:За...

 

2009 studio album by Emily Jane WhiteVictorian AmericaStudio album by Emily Jane WhiteReleasedOctober 9, 2009 (France)April 27, 2010 (US)GenreNeofolk, Folk, Dark folk, RockLabelTalitres Records (France)Milan Records (US)ProducerNick Bobetsky, Jean-Christophe Chamboredon, Emily Jane WhiteEmily Jane White chronology Dark Undercoat(2007) Victorian America(2009) Ode to Sentience(2010) Victorian America is the second album by Emily Jane White released on October 9, 2009, in France by Talit...

 

Francesco Domenico Guerrazzi BiografiKelahiran12 Agustus 1804 Livorno Kematian23 September 1873 (69 tahun)Cecina Member of the Chamber of Deputies of the Kingdom of Italy (en) 22 Maret 1867 – 2 November 1870 Masa parlemen: 10th Legislature of the Kingdom of Italy (en) Member of the Chamber of Deputies of the Kingdom of Italy (en) 18 November 1865 – 13 Februari 1867 Masa parlemen: 9th Legislature of the Kingdom of Italy (en) Member of the Chamber of Deputies of the Kingdom of Ita...

В Википедии есть статьи о других людях с такой фамилией, см. Чумаков; Чумаков, Сергей. Сергей Яковлевич Чумаков председатель исполнительного комитета Ленинского районного Совета депутатов трудящихся города Молотова июнь 1942 года — сентябрь 1944 года Предшественник Дми�...

 

Location of Mississippi in the United States Gun laws in Mississippi regulate the sale, possession, and use of firearms and ammunition in the state of Mississippi in the United States. Gun laws in Mississippi are among the most permissive in the country, with no license or background check required to openly carry handguns most anywhere in the state. Summary table Subject / law Long guns Handguns Relevant statutes Notes State permit required to purchase? No No Firearm registration? No N...

 

Zhou Gengsheng周鲠生Lahir(1889-03-18)18 Maret 1889Kabupaten Changsha, Hunan, Tiongkok QingMeninggal20 April 1971(1971-04-20) (umur 82)Beijing, Republik Rakyat TiongkokAlmamaterUniversitas WasedaUniversitas EdinburghUniversitas ParisPekerjaanYuris Dalam nama Tionghoa ini, nama keluarganya adalah Zhou. Zhou Gengsheng (Hanzi: 周鲠生; 18 Maret 1889 – 20 April 1971) adalah seorang yuris, sejarawan dan akademisi Tiongkok. Biografi Lahir di Kabupaten Changsha, Hunan, ...

.vc

.vc البلد سانت فينسنت والغرينادين  الموقع الموقع الرسمي  تعديل مصدري - تعديل   vc. هو امتداد خاص بالعناوين الإلكترونية (نطاق) domain للمواقع التي تنتمي إلى سانت فينسنت والغرينادين.[1][2] مراجع ^ النطاق الأعلى في ترميز الدولة (بالإنجليزية). ORSN [الإنجليزية]. Archived from the ori...

 

此條目需要精通或熟悉相关主题的编者参与及协助编辑。請邀請適合的人士改善本条目。更多的細節與詳情請參见討論頁。 外科医生施行手术。 普通外科(英語:General surgery)是外科領域的一種專業分科,又稱為一般外科[1]或消化外科。普通外科牽涉的領域甚廣,是藉由臨床實踐、研究或教學等方式,了解如何以外科方法,處理各種腹腔器官疾病的臨床學科。 普通外...