Louis Pasteur naît à Dole le , dans l'ancien quartier des Tanneurs, dans le centre pittoresque de Dole, rue des Tanneurs, le long du canal des Tanneurs. Fils de Jean-Joseph Pasteur qui exerce par tradition familiale la profession d'employé tanneur, et de Jeanne-Étiennette Roqui.
En 1826[réf. nécessaire] âgé de 3 ans, Louis Pasteur s'installe avec ses parents à Marnoz, dans la maison familiale maternelle héritée par sa mère, puis en 1830 à Arbois (maison de Louis Pasteur à Arbois). Le , Louis Pasteur participe à l'inauguration de la plaque d'identification de sa maison natale. Il prononce son célèbre discours en hommage à ses parents : « Ô mon père et ma mère, ô mes chers disparus, vous qui avez si modestement vécu dans cette petite maison, c’est à vous que je dois tout... ».
La ville achète la maison en 1912. Elle est transformée en musée, qui est inauguré en par le président de la RépubliqueAlexandre Millerand, peu après le centenaire de la naissance de Louis Pasteur. Le musée présente une vision complète de la vie de Pasteur et de son œuvre scientifique[2]. Une rénovation est réalisée en 1995 ainsi qu'une augmentation de surface en 2007[2].
L'exposition est répartie sur 2 niveaux, dans 8 salles d’exposition, et au bord du canal, la tannerie artisanale du père de Louis, Jean-Joseph Pasteur.
Vitrines, maquettes et vidéos présentent ses souvenirs familiaux, ses grandes découvertes. De nombreux objets et écrits personnels sont présentés. Une partie de la collection est issue d'un legs de Louis Pasteur Vallery-Radot, petit-fils et dernier hériter de Pasteur.
Le musée est ouvert tous les jours d'avril à fin octobre. L'établissement est fermé hors saison sauf le week-end et pour les groupes sur rendez-vous[2], pour une visite d'environ 45 à 90 minutes.
