John Stamos est le fils d’une mère irlandaise et d’un père grec. Ses grands-parents, qui s'appelaient Stamatopoulos, ont choisi de raccourcir leur nom en Stamos lorsqu’ils ont émigré aux États-Unis.
Il est également musicien, il chante, joue de la guitare et de la batterie.
Il apparaît dans le clip Kokomo des Beach Boys, où il joue des percussions. Il apparaît aussi quelques secondes dans le clip « I'll be over you » de TOTO en 1985.
En 1987, il se fait connaître grâce à la série télévisée La Fête à la maison, après avoir fait ses débuts dans Père et impairs[1]. Pendant huit ans, il incarne l’oncle Jesse de la famille Tanner. Son personnage était très apprécié et c’est l’annonce de son départ à la fin de la huitième saison qui a précipité l’arrêt du feuilleton en 1995.
Après La fête à la maison, John Stamos enchaîne les petits rôles dans des productions telles que Alerte à Hawaï ou Femme Fatale.
En 2001, John Stamos est de retour à la télévision dans un rôle principal avec Voleurs de charme. Après seulement 10 épisodes, la série n'est toutefois pas renouvelée. Il fait ensuite des apparitions dans Friends et dans Urgences.
En 2005, il joue dans la série Jake in progress, dans laquelle il incarne le personnage principal : un attaché de presse new-yorkais à la recherche de l’âme sœur. La série est annulée après deux saisons.
John Stamos rejoint le casting de la saison 13 de Urgences, série dans laquelle il était déjà apparu. Il garde son rôle jusqu'à la fin de la série, en 2009.
En 2010, il interprète un dentiste nommé Carl Howell dans la saison 2 de la série Glee.
Depuis 2015, il joue le rôle de Jimmy, un séducteur qui apprend qu'il a des enfants, dans la série Grandfathered.
En 2022, il participe à plusieurs concerts des Beach Boys jouant de la guitare et de la batterie avec le groupe emmené par Mike Love. Le 27 juin, il les accompagne une dernière fois dans le cadre de la tournée des 60 ans à l'Olympia à Paris, jour du 80e anniversaire de Bruce Johnston qui souffle ses bougies sur scène.
↑Margarida Bastos, « 'Muppets Haunted Mansion': Disney+ Halloween Special Gets a Release Date and Spooky Poster », Collider, (lire en ligne, consulté le )