Cette technique se déroule en 3 étapes : la séparation des molécules à analyser, le transfert sur une membrane de PVDF puis la détection de ces molécules. Contrairement aux autres techniques de transfert qui utilisent préférentiellement l'électrophorèse comme méthode de séparation, le far-eastern blot utilise la chromatographie sur couche mince haute-performance, compatible avec les molécules hydrophobes ou non-ioniques. Après le transfert sur une membrane, plusieurs méthodes de détection peuvent être utilisées :
l'identification directe par spectrométrie de masse[3], qui peut apporter des informations sur la structure des molécules à analyser.
Il est également possible d'utiliser cette technique sans séparation (technique du dot blot).
Notes et références
↑(en) Taki T., Handa S. and Ishikawa D., « Blotting of Glycolipids and Phospholipids from a High-Performance Thin-Layer Chromatogram to a Polyvinylidene Difluoride Membrane », Analytical Biochemistry, vol. 221, no 2, , p. 312-316 (lire en ligne)
↑(en) Taki T., Kasama T., Handa S. and Ishikawa D., « A Simple and Quantitative Purification of Glycosphingolipids and Phospholipids by Thin-Layer Chromatography Blotting », Analytical Biochemistry, vol. 223, no 2, , p. 232-238 (lire en ligne)
↑Taki T., Ishikawa D., Handa S. and Kasama T. Direct Mass Spectrometric Analysis of Glycosphingolipid Transferred to a Polyvinylidene Difluoride Membrane by Thin-Layer Chromatography Blotting Analytical Biochemistry Volume 225, Issue 1, February 1995, Pages 24-27