El método de Miles y Misra o conteo de microorganismos viables en superficie es una técnica utilizada para calcular el número de unidades formadoras de una colonia en una suspensiónbacteriana. Fue descubierto por Miles y Misra en 1938.
El procedimiento de la técnica es el siguiente:
Se preparan una serie progresiva de diluciones en serie de la suspensión bacteriana original, tantas como sean necesarias.
Los materiales necesarios son una micropipeta correctamente calibrada que pueda surtir gotas de 0.02ml y 6 placas de agar nutritivo. Estas placas se dividen en sectores numerados.
La suspensión o dilución se coloca en forma de gotas (0.02ml) desde una altura de 2,5 cm; ésta se dispersará aproximadamente en un área de 1.5 a 2.0 cm de diámetro.
Cada una de las 6 placas tendrá una gota de cada dilución en el sector correspondiente (numerado)
Periodo de incubación: 18-24 horas. Posteriormente, se observa su crecimiento.
Los sectores en los que hay más de 20 colonias no muestran confluencia y son utilizados para realizar los conteos de viabilidad.
El número de bacterias viable por 0.02ml de una dilución se obtiene calculando la media de los contajes para cada dilución en las 6 placas.