Inició su carrera como actriz en la obra teatral Los miserables (2000), donde interpretó a Cosette, y a la cual le siguieron Brilla la luz (2002), El principito (2002-2003), Hechos de los apóstoles (2005), El príncipe azul de Cenicienta (2006) y La metamorfosis (2007). En televisión, tuvo una breve participación en el programa Dadyvertido (2001) y prestó su voz para la película animada Dibu 3, la gran aventura (2002). Pero no fue hasta en 2004, donde consiguió el papel protagónico en la serie Frecuencia 04 de Telefe.[1] Al año siguiente fue parte de la telenovela Paraíso rock y anteriormente realizó el doblaje de voz para las películas Patoruzito y Los Increíbles. En 2006, nuevamente participó de la saga Patoruzito, prestando su voz para el personaje de Malén en Patoruzito 2, la gran aventura. Ese mismo año, fue conductora de Disney Planet y Zapping Zone emitidos por Disney Channel.
En 2007, Otero se une al elenco principal de la telenovela Mujeres de nadie, donde interpretó a Eugenia Gutiérrez. Posteriormente, realizó el doblaje de la película argentina Valentina y protagonizó la comedio musical Rent en el Teatro Ciudad Cultural Konex. Al mismo tiempo, Florencia protagonizó la serie infantil La maga y el camino dorado de Nickelodeon y fue partícipe de varios conciertos musicales junto a Germán Tripel en distintos teatros y cafés.
A partir de 2010, cobró gran notoriedad al integrar el elenco principal de la obra teatral Despertar de primavera, por la cual recibió nominaciones a los premios ACE y premios Hugo como mejor actriz en musical y ese año formó parte de la ficción Alguien que me quiera. Entre 2011 y 2012, enfocó su carrera en el teatro conformando los elencos de El flautista de Hamelin (2011, 13), Noche de reyes (2011), Embarazados (2011), Casi normales (2011-2012) y Mambrú vuelve de la guerra (2012), por algunas de estas obras recibió numerosas nominaciones a diferentes premios del teatro. Durante ese periodo, Otero formó parte de las cintas cinematográficas Los elegidos (2011), Desmadre (2012) y El grito en la sangre (2012).
En 2013, fue la protagonista del musical Tango feroz y en televisión participó de las ficciones Jorge y Solamente vos. En 2014, Florencia nuevamente se avocó al teatro siendo parte de las obras teatrales La nota mágica, Como les guste y Oz, en concierto, sin embargo, siguió trabajando en el cine participando de la película Yo se lo que envenena. En 2015, realizó espectáculo musicales donde desplegaba su talento como cantante en Oteros en cinta y Damas & sres del musical.
Seguidamente, Florencia protagonizó Franciscus, una razón para vivir y Los últimos 5 años en el teatro. En 2017, volvió a la televisión, interpretando a Elena en la telenovela Las Estrellas de El trece y formó parte de Reencuentros, un especial televisivo de Fundación Huésped. Ese año, en teatro integró los elencos de Quién retiene a quién y Murder Ballad. En 2018, actuó en la obras teatrales Rapunzel y El violinista en el tejado.
En 2019, Otero se destacó en distintos papeles teatrales en las obras Desencantadas, No hagas eso, hablemos! y La habitación de Verónica. Poco después, protagonizó en streaming las piezas teatrales Lucía en el mundo de María Elena y Maestras en pandemia. En 2021, Otero estelarizó el programa infantil TAF, taller fantástico en el papel de Pali. Más tarde, se unió al elenco de la obra Madres, el musical, en el cual interpretó a Nina.
Vida personal
Desde 2011, se encuentra casada con el actor y cantante de Mambrú Germán "Tripa" Tripel, a quien conoció trabajando en la obra teatral Rent (2008).[2] En 2015, la pareja tuvo a su primera hija llamada Nina.[3]