Jitka Zelenohorská wuchs in Prag auf, wo sie bis heute lebt.
Sie wirkte ab ihrem 15. Lebensjahr in Spielfilmen mit. Später absolvierte sie eine professionelle Schauspielausbildung an einer Schauspielschule in Prag. Sie wirkte als Schauspielerin vor der Kamera von 1961 bis zum Jahr 2014 in über 100 Film-und-Fernsehproduktionen mit,[1][2] darunter auch in einigen DEFA-Filmen.[3][4] Als Bühnendarstellerin wirkte sie in zahlreichen Theaterstücken, Musicals, Ballett-Aufführungen, Varieté-Shows und in Kabarett-Programmen mit, so unter anderem auch am Semafor-Theater, wo sie langjährig als festes Ensemblemitglied engagiert war.
Zelenohorská war zweimal verheiratet. Beide Ehen blieben kinderlos. In den 1960er-Jahren führte sie eine Beziehung mit dem Schlagersänger Waldemar Matuška.[5]
