Jan Hooks spielte bereits Theater in der High School in Fort Myers. Nach ihrem Abschluss 1975 wurde sie Mitglied der Comedy-Truppe The Groundlings. Ab 1980 hatte sie erste TV-Auftritte. Landesweit bekannt wurde sie ab 1986 als Mitglied der Sendung Saturday Night Live, hier spielte sie zahlreiche Sketche und führte Imitationen vor, darunter von Hillary Clinton, Sinéad O’Connor, Nancy Reagan, Bette Davis und viele mehr.