Die Eerste Divisie 1964/65 war die neunte Spielzeit der zweithöchsten niederländischen Fußballliga. Sie begann am 23. August 1964 und endete am 2. Mai 1965.
Die 16 Mannschaften spielten an insgesamt 30 Spieltagen aufgeteilt in einer Hin- und einer Rückrunde jeweils zwei Mal gegeneinander. Die ersten zwei Teams stiegen in die Eredivisie auf. Die beiden letzten Vereine stiegen ab.
Bei Punktgleichheit entschied der Torquotient über die Platzierung.
Die Enschedese Boys fusionierten nach Saisonende mit dem FC Twente Enschede aus der Eredivisie.
Kreuztabelle
Die Kreuztabelle stellt die Ergebnisse aller Spiele dar. Die Heimmannschaft ist in der ersten Spalte aufgelistet, die Gastmannschaft in der obersten Reihe. Die Ergebnisse sind immer aus Sicht der Heimmannschaft angegeben.