Plicní tkáň pacienta s emphysemou barveno hematoxylinem a eosinem .
Na tento článek je
přesměrováno heslo
Barvení . Tento článek je o biochemické metodě. O zušlechťování textilních výrobků pojednává článek
Barvení textilií .
Barvení je biochemická metoda, kterou se přidá k substrátu specifická barvící látka (barvivo ) a slouží v biologii na prokázání výskytu (kvalifikaci) nebo množství (kvantifikaci) specifické látky ve zkoumané tkáni nebo v pletivu , nebo k obarvení celých struktur a objektů, které zlepšuje nebo umožňuje jejich pozorování optickým mikroskopem .
Užívaná barviva
abecedně:
bismarckova hněď
karmín – barví jádra červeně, extrakt ze samiček červce nopálového (Coccus cacti ), nepřebarvuje, dříve využíván v embryologických studiích pro barvení celých bloků tkání.
Coomassie
DAPI
eosin
Erie garnet = direct red 10
etidium bromid
fenolová červeň
hematoxylin
Hoechstovo barvivo
jód
jádrová červeň „Kerlechtrot“ – barví jádra červeně, v roztoku síranu hlinitého
Kongo červeň = Congo red = direct red 28 – barví amyloid červeně
krystalová violeť
kyselina pikrová (2,4,6-trinitrofenol) – barví cytoplazmu buněk a svaly žlutě
kyselý fuchsin – kolagenní vlákna červeně
Luciferová žluť – fluorescenční barvivo
malachitová zeleň
methylová zeleň
methylová modř
neutrální červeň
nilská modř
nilská červeň = Nile blue oxazone – barví tukové kapénky červeně
olejová červeň = oil red O – barví tuk červeně
rhodamin
safranin
saturnová červeň (sirius red F3B, direct red 80, F3B 200, C. I. No. 35780, CAS No. 2610-10-8) – azobarvivo , kolagenní vlákna barví červeně, případně barvení amyloidu
irius red 4B = direct red 79 = L4B 200 – azobarvivo
šafrán – barví kolagen, extrakt z blizen šafránu setého
Weigertův železitý hematoxylin = Weigert's Iron Hematoxylin – barví chromatin v jádrech šedě nebo temně hnědě (modročerně až hnědočerně)
Barvicí metody
Existuje mnoho detailně rozpracovaných barvících metod, z nejvýznamnějších je možné uvést:
Barvení mukopolysacharidů
Mukopolysacharidy se barví směsí PAS , alciánové modři a hematoxylinu , a to tímto postupem:
odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.), oplach v destilce
kyselina jodistá 0,5 % 5 minut
praní vodou 2–3 min, oplach destilovanou vodou
Schiffovo reagens 20–30 min
tekoucí voda 10 min., oplach destilovanou vodou
alciánová modř (před použitím se doporučuje přefiltrovat) 1-2 hod.
oplach vodou
hematoxylin 5 min.
praní 20 min., oplach destilovanou vodou, oplach absolutním alkoholem, xylen 3 (5 min.), xylen 4 (5 min.), montování
Výsledek:
Barvení kolagenních vláken
Kolagenní vlákna je možné barvit za použití saturnové červeni a Weigertova železitého hematoxylinu :
odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.)
důkladně proprat ve vodě
Weigertův železitý hematoxylin (roztok A + roztok B 1 : 1) 5 min. nebo gallocyanin 24 hod.
praní v tekoucí vodě 5–10 min.
saturnová červeň 1–20 min. (10 ml 1 % roztoku saturnové červeně + 90 ml nasyceného roztoku kys. pikrové )
několikrát oplach v absolutním alkoholu, xylen 3, xylen 4, montování
Výsledek:
Barvení elastických vláken
(orcein + hematoxylin )
odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.), oplach v destilované vodě
orcein 6-8 hod. při teplotě 38-40 °C
oplach destilovanou vodou
oplach kyselým alkoholem 70 %
praní ve vodě
hematoxylin 5 min.
praní 20 min., oplach destilovanou vodou, oplach absolutním alkoholem, xylen 3, xylen 4, montování
Výsledek:
Giemsovo barvení
Gramovo barvení
Základní barvící metoda v mikrobiologii. Barvíme fixovaný preparát.
krystalová violeť na 20s – oplach ve vodě
Lugolův roztok na 20s – oplach ve vodě
aceton – odbarvení (dokud odtéká barva z preparátu)
Karbolfuchsin na 20s – oplach ve vodě.
Externí odkazy
Obrázky, zvuky či videa k tématu barvení na Wikimedia Commons
Metody :
Barviva :