Alexandre de Mèdici fou assassinat el 1537 pel seu cosí Llorenç, conegut amb el nom de Lorenzaccio, motiu pel qual accedí al poder Cosme I de Mèdici, membre d'una branca menor de la Dinastia Mèdici. Impulsor de les arts i del mecenatge, tampoc oblidà les seves aspiracions territorials, aconseguint la integració l'any 1559 de la República de Pisa.